PK Mito Red/Orange/Deep Red實驗步驟

PK Mito Deep Red 線粒體探針是一種基于活細胞成像的熒光染料，能夠特異性結合到各類細胞的線粒體上。與傳統染料相比，PKMITO 系列線粒體染料光毒性大幅度降低，能夠在成像時最大程度保持線粒體狀態，是非常好的超分辨及長時程線粒體成像染料。每份PKMITO 染料足夠100-500次成像。

浦海景珊(Genvivo)的PK Mito線粒體探針，基于北京大學陳知行團隊于2020年發表于英國皇家化學會旗艦期刊Chemical Science的學術成果的轉化，德國馬普所的Stefan W. Hell教授（2014年諾貝爾化學獎得主）特別點贊PK Mito使用效果，他強調：“PK Mito高度還原了線粒體精細動態的細節?！?/span>

PK Mito能夠特異性結合到各類細胞的線粒體上，與傳統染料相比，PKMITO系列線粒體染料能夠實現超分辨率成像，使細胞輪廓更清楚，同時光毒性大幅度降低，能夠在成像時最大程度保持線粒體狀態，最大程度減少對生物細胞生理反應的影響，是絕佳的超分辨及長時程線粒體成像染料。  

目前艾美捷PKMITO系列主要供應3款不同顏色的探針：

名稱 貨號 包裝 適用范圍

PK Mito Red PKMR-1 25nmol 熒光顯微鏡、Confocal、SIM

PK Mito Orange PKMO-1 25nmol 熒光顯微鏡、Confocal、SIM、STED

PK Mito Deep Red PKMDR-1 25nmol 熒光顯微鏡、Confocal、SIM

保存條件：-20℃，避光

保質期：1年

實驗步驟：

1在PK Mito Red/ Orange/ Deep Red中加入100pL新鮮干燥的DMSO,混合均勻，得到250μM母液。

2將培養基預熱至37℃,將PK Mito Red/ Orange/ Deep Red母液按照1000-5000倍稀釋比例加入到預熱的培養基中，稀釋后的染液建議盡快使用，久置后可能導致部分染料分解或沉淀。

3吸去細胞原有的培養基，更換為稀釋好的培養基染液，在培養箱中孵育15分鐘。

4用預熱的培養基清洗細胞一至兩次，即可用于熒光成像。

注：建議對大多數細胞系和原代細胞使用200-300 nM,如HeLa、COS7、U-2OS、Vero細胞、原代神經元、脂肪細胞和肝細胞；對組織染色使用500-600 nM。不同樣品染色條件有所差異，建議起始染色方法為1000倍稀釋，15分鐘染色，請根據實際染色效果進行調整。

PK Mito Orange(貨號：PKMDR-1)成像結果賞析：

Hessian-SIM 超分辨成像中PK Mito Red和商業探針MitoTracker Red的光毒性對比

浦海景珊生物技術有限公司（Genvivo Biotech）是一家提供高端成像試劑的公司，Genvivo的目標是開發一系列適應于超分辨成像的染料技術。PKMITO系列線粒體染料，Gen Fluor系列熒光染料及抗體是他們先推出的適應于超分辨熒光成像產品。目前他們正在繼續深耕新一代產品研發，旨在為科研用戶和企業用戶提供極致的成像體驗。其開發的拳頭產品PKMITO系列線粒體染料是基于北京大學學術成果轉化，是市面上持續時間最長，細胞毒性特別小的超分辨率的線粒體探針。