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純化正常兔IgG,DEAE層析+免疫電泳雙重質控

發布者:艾美捷科技    發布時間:2026-04-13     
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一、產品概述

由艾美捷代理Bethyl Laboratories推出的純化正常兔lgG(5mg/ml)(貨號:P120-101)為從正常兔血清中分離純化的總免疫球蛋白G(IgG),經離子交換層析純化,未偶聯任何標簽或標記物。正常兔IgG廣泛用作免疫檢測實驗中的陽性對照、同型對照或封閉試劑,用于評估非特異性背景或驗證實驗體系的有效性。本產品濃度為5 mg/ml,緩沖液為含疊氮化鈉的磷酸鹽緩沖液(PBS),可在2–8°C穩定保存2年。

 

二、關鍵規格

參數 | 詳細信息

物種 | 兔

表位標簽 | 無

同型 | IgG

偶聯物 | 未偶聯

純度 | 純化(非親和純化,采用分級分離+DEAE層析)

濃度 | 5 mg/ml

保存條件 | 2 – 8 °C

有效期 | 收貨后2年

緩沖液 | 磷酸鹽緩沖液(PBS),含0.09%疊氮化鈉

 

三、產品形式與組成

本品以液體形式提供,溶于磷酸鹽緩沖液(PBS),pH 7.2–7.4,并加入0.09%疊氮化鈉作為防腐劑??偟鞍诐舛葹? mg/ml(基于IgG在280 nm處吸光系數A280 = 1.4,1 mg/ml IgG)。包裝規格未明確列出,通常根據訂單提供不同體積(如1 mg、5 mg、10 mg等),請以實際產品標簽為準。

 

四、生產與純化工藝

純化方法

本產品通過分級分離(fractionation) 結合DEAE(二乙氨乙基)離子交換層析從正常兔血清中分離獲得。該工藝可有效去除血清中的白蛋白、其他球蛋白(IgA、IgM)及非蛋白組分,獲得高純度的總IgG。

濃度測定

采用比爾定律(Beer’s Law)測定蛋白質濃度,設定1 mg/ml IgG在280 nm波長處的吸光度為1.4。根據實際測得的A280值計算濃度:  

濃度(mg/ml)= A280 / 1.4

 

五、質量控制:免疫電泳驗證

為確認產品純度和免疫學特性,生產商對純化產物進行了免疫電泳分析,結果表明:

1. 與抗兔IgG特異性血清反應:證實該產物為兔IgG。

2. 不與抗兔IgA或抗兔IgM血清反應:排除了IgA和IgM的污染,表明純度良好。

3. 與抗兔全血清反應產生單一沉淀弧:該沉淀弧與抗IgG血清產生的沉淀弧一致,進一步確認產物僅為IgG,無其他血清蛋白殘留。

 

六、儲存與穩定性

保存條件:2–8°C,嚴禁冷凍。反復凍融會導致蛋白變性、聚集或活性喪失。

有效期:自收貨之日起2年,在未受污染且正確儲存條件下。

防腐劑:0.09%疊氮化鈉可抑制微生物生長。注意:疊氮化鈉對HRP有抑制作用,如用于HRP檢測系統,請確保充分洗滌;如需去除疊氮化鈉,可使用脫鹽柱或透析。

 

七、ELISA陽性對照

1. 用PBS將本產品稀釋至1–10 ?g/ml,100 ?l/孔包被ELISA板,4°C過夜。

2. 洗滌、封閉后,加入稀釋后的抗兔IgG-HRP二抗(如1:5000)。

3. 孵育后洗滌,加底物顯色。應出現明顯陽性信號。

 

八、同型對照(流式細胞術)

1. 將本產品與實驗一抗稀釋至相同濃度(如2 ?g/ml)。

2. 分別取等體積對照抗體和實驗抗體,加入至不同樣本管中,4°C孵育30分鐘。

3. 洗滌后加入熒光標記的抗兔IgG二抗,檢測信號。同型對照管應給出背景熒光水平。

 

九、相關產品推薦

抗兔IgG(全分子)HRP偶聯物(用于WB/ELISA檢測)

抗兔IgG輕鏈特異性HRP偶聯物(用于IP-WB,避免重鏈干擾)

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本產品為經過嚴格質控的純化正常兔IgG,濃度高、純度高、穩定性好,是免疫學實驗中可靠的對照試劑。


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