抗HdmX/MDM4兔多克隆抗體，輕鏈特異性二抗兼容設計方案

一、產品概述

HdmX（又稱MDM4）是p53信號通路的關鍵負調控因子，與MDM2協同作用抑制p53的轉錄活性并促進其降解。由艾美捷代理Bethyl Laboratories推出的抗HdmX/MDM4兔多克隆抗體（A300-287A）為針對人HdmX/MDM4蛋白的兔多克隆抗體，經抗原親和純化，適用于免疫沉淀（IP）和蛋白質印跡（WB）檢測?？贵w識別表位位于MDM4蛋白第125–175位氨基酸區域，可特異性檢測人源MDM4蛋白，為p53通路研究提供可靠工具。

二、關鍵規格

參數 | 詳細信息

靶標 | HdmX / MDM4

反應性 | 人

應用 | IP, WB

宿主 | 兔

克隆性 | 多克隆

形式 | 完整IgG

免疫原 | 第125–175位氨基酸區域

同型 | IgG

偶聯物 | 未偶聯

純度 | 抗原親和純化

抗原種屬 | 人

濃度 | 1000 ug/ml

保存條件 | 2 – 8 °C

有效期 | 收貨后1年

緩沖液 | Tris-檸檬酸鹽/磷酸鹽緩沖液，pH 7-8，含0.09%疊氮化鈉

三、生物學背景

MDM4（Gene ID 4194，Uniprot O15151，官方基因名MDM4，p53 regulator）是mouse double minute 4的人類同源物，又稱HDMX、MDMX或MRP1。MDM4蛋白包含RING指結構域，可與p53直接相互作用。雖然MDM4本身缺乏E3泛素連接酶活性，但它通過與結構相似的MDM2結合，增強MDM2介導的p53泛素化和蛋白酶體降解。此外，MDM4還可直接抑制p53的轉錄激活功能，是p53通路中不可或缺的負調控因子。

MDM4在多種腫瘤中過表達，通過抑制p53活性促進腫瘤發生和耐藥性，因此成為癌癥研究和藥物開發的重要靶點。本抗體識別的表位位于MDM4蛋白的第125–175位區域，該區域靠近N端p53結合域，適合檢測全長MDM4及其相互作用復合物。

別稱：Double minute 4蛋白、HDMX、MDM2樣p53結合蛋白、MDM4蛋白變異體G/Y、MRP1、p53結合蛋白MDM4等。

四、儲存與穩定性

抗體以1000 ug/ml濃度提供于Tris-檸檬酸鹽/磷酸鹽緩沖液（pH 7-8）中，含0.09%疊氮化鈉防腐劑。收到后請于2–8°C條件下儲存，嚴禁冷凍。反復凍融會導致蛋白變性或聚集。在此條件下，自收貨之日起可穩定保存1年。

注意：疊氮化鈉具有毒性，且可能抑制HRP活性。如用于HRP檢測系統（如WB中的化學發光），應確保充分洗滌；若需去除防腐劑，可使用脫鹽柱或透析。

五、應用與推薦稀釋度

蛋白質印跡（WB）

推薦稀釋范圍：1:1000 – 1:5000

封閉與抗體稀釋液：5%脫脂牛奶-TBST

一抗孵育：過夜孵育（推薦4°C）

標準WB二抗：山羊抗兔IgG（重鏈+輕鏈）抗體（貨號A120-101P）

免疫沉淀后WB的特殊注意事項

當檢測免疫沉淀復合物中的MDM4時，常規抗兔IgG二抗會識別免疫沉淀所用抗體的重鏈（約55 kDa）和輕鏈（約25 kDa）。MDM4的分子量約為55–60 kDa，與IgG重鏈大小接近，可能被重鏈信號掩蓋。因此，免疫沉淀產物的WB檢測推薦使用抗兔IgG輕鏈HRP偶聯抗體，并在封閉緩沖液中添加5%正常豬血清（貨號S100-020），以選擇性識別輕鏈而避免重鏈干擾。

免疫沉淀（IP）

推薦用量：6 ug抗體 / mg細胞裂解液

六、注意事項

1. 僅限研究使用：本產品僅用于生命科學研究，不得用于臨床診斷、治療或人體相關應用。

2. 安全操作：緩沖液含疊氮化鈉，操作時請佩戴防護手套和護目鏡，避免皮膚接觸。

3. 批次驗證：不同批次抗體濃度已標準化為1000 ug/ml，但建議收到新批次后在特定應用中進行稀釋度驗證。

本抗體為研究MDM4在p53信號通路、腫瘤發生及耐藥性中的功能提供了高特異性的檢測工具。