Epigenase APOBEC 3胞苷脫氨酶活性/抑制測定試劑盒，操作步驟簡單，4小時內完成

APOBEC3胞嘧啶脫氨酶（載脂蛋白B mRNA編輯酶催化多肽3）是一個DNA/RNA編輯家族，包含7個亞型：APOBEC3A、APOBEC3B、APOBEC3C、APOBEC3E、APOBEC3F、APOBEC3G和APOBEC3H。APOBEC3僅存在于哺乳動物中，能夠催化單鏈DNA或RNA中胞嘧啶（C）堿基的氨基去除，形成尿嘧啶（U）。APOBEC3引起的遺傳改變會改變轉錄和mRNA處理過程，并積極參與多種生物學過程。APOBEC3是先天免疫系統的一部分，能夠抵御各種DNA或RNA病毒，保護細胞的完整性。通過促進單鏈DNA/RNA中胞嘧啶脫氨基為尿嘧啶，APOBEC3在病毒基因組中產生突變，從而抑制病毒復制。例如，有報道稱APOBEC3在SARS-CoV-2基因組中引起的C到U突變是主導突變（>50%）。盡管APOBEC3賦予宿主對包括SARS-CoV-2在內的多種病毒的內在抗感染能力，但它也可能對病毒的進化產生潛在影響。APOBEC3在癌癥中的DNA突變中貢獻顯著。作為癌癥進化的主要驅動力之一，APOBEC3蛋白是多種腫瘤中檢測到的基因組突變的主要原因之一。超過50%的癌癥中可以觀察到APOBEC3突變特征，這些特征促進了腫瘤的多樣性，進一步推動疾病進展和對治療的耐藥性。

Epigenase APOBEC3胞嘧啶脫氨酶活性/抑制檢測試劑盒是一套完整的優化緩沖液和試劑，用于測量來自人類和其他哺乳動物的細胞提取物或純化的APOBEC3亞型（A3A、A3B、A3C、A3D、A3F和A3H）的總APOBEC3酶活性或抑制情況，適用于多種形式的樣本，包括但不限于培養細胞和新鮮/冷凍組織。

艾美捷Epigentek-Epigenase APOBEC 3胞苷脫氨酶活性/抑制測定試劑盒（#P-3140-96）具有以下優勢：

比色法檢測：操作步驟簡單，可在4小時內完成。  

直接測量總APOBEC3活性：通過簡單檢測APOBEC3轉化的終產物來直接測量總APOBEC3活性。  

創新的試劑盒組成：背景信號極低，使檢測過程簡單、準確、可靠且一致。  

適用于細胞/組織提取物和純化APOBEC3酶：可用于檢測APOBEC3抑制劑在體內和體外的效果。  

高靈敏度：檢測限低至10 ng純化的APOBEC3酶。  

包含C到U轉化標準品：用于定量APOBEC3的比活性。  

條板微孔板格式：支持手動或高通量分析。

原理與流程：

在此實驗中，底物預先涂覆在微孔板孔中?；钚訟POBEC3酶結合到底物上，并將胞嘧啶轉化為尿嘧啶產物。APOBEC3轉化的產物可以通過特異性探針識別。通過在微孔板光譜光度計上以450 nm波長讀取吸光度，可以比色法測量與酶活性成正比的尿嘧啶產物的比例或量。APOBEC3酶的活性與測量到的光密度強度成正比。

左圖：使用APOBEC檢測標準生成的示例標準曲線。    

右圖：使用重組APOBEC3A實現的APOBEC3活性。  

使用Epigenase APOBEC3胞嘧啶脫氨酶活性/抑制檢測試劑盒進行實驗，添加了不同濃度的重組人APOBEC3A酶。

起始材料與輸入量：

每個實驗所需的細胞提取物量為2 ug至30 ug，最佳范圍為15-20 ug。純化酶的用量為10 ng至1 ug，具體取決于酶的類型、純度和催化活性。