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特色產品MBD2是MBD蛋白家族的成員。MBD2能夠選擇性地結合甲基化DNA,并通過招募轉錄抑制復合物來抑制甲基化靶基因的轉錄。作為一種能夠識別甲基化CpG DNA的表觀遺傳“閱讀器”蛋白,MBD2已被認證為癌癥治療的新靶點。此外,一些證據也表明該蛋白與神經發育有關。MBD2與甲基化DNA的結合活性可能會受到MBD2突變以及生化或藥理干預的影響。選擇性且強效的MBD2抑制可以誘導基因重新表達,這在癌細胞中MBD2基因破壞時已被觀察到。因此,檢測MBD2的結合活性及其抑制作用對于闡明基因激活和沉默的表觀遺傳調控機制至關重要,同時也有助于癌癥和神經疾病治療學的發展。
EpiQuik MBD2結合活性/抑制超敏檢測試劑盒是一套完整的優化試劑,用于測量來自多種物種(包括哺乳動物、植物、真菌和細菌)的核提取物或純化MBD2蛋白的MBD2結合活性或抑制情況,適用于多種形式的樣本,包括但不限于培養細胞和新鮮/冷凍組織。
艾美捷Epigentek-EpiQuik MBD 2結合活性/抑制測定Ultra試劑盒(#P-3099-96)具有以下優勢:
快速:比色法檢測可在3小時內完成。
直接:在有無抑制劑的情況下直接測量MBD2結合活性。
用途廣泛:適用于細胞/組織提取物或純化的MBD2蛋白,可用于檢測TET羥化酶抑制劑在體內和體外的效果。
靈敏:能夠檢測低至10 ng純化MBD2蛋白的活性。
便捷:包含MBD2蛋白標準品,用于定量分析。
靈活:采用條板微孔板格式,支持手動或高通量分析。
原理與流程:
在此實驗中,甲基化DNA被穩定地涂覆在微孔板孔中?;钚訫BD2蛋白能夠結合到甲基化DNA上。結合的MBD2蛋白可以通過特異性抗體識別。結合的MBD2-抗體復合物的信號強度與結合活性成正比,可以通過增強劑放大,并通過在微孔板光譜光度計上以450 nm波長讀取吸光度來進行比色法測量。MBD2的結合活性與測量到的光密度強度成正比。

左圖:EpiQuik MBD2結合活性/抑制超敏檢測試劑盒的流程示意圖。
右圖:使用MBD2蛋白標準生成的示例標準曲線。
起始材料與輸入量:
輸入材料可以是核提取物或純化的MBD2蛋白。每個實驗所需的核提取物量為2 ug至20 ug,最佳范圍為5-10 ug。純化蛋白的用量為10 ng至500 ng,具體取決于蛋白的純度和催化活性。

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