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Digoxigenin-11-dUTP:用于DNA / cDNA探針的制備和測序

發布者:艾美捷科技    發布時間:2024-04-09     
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Digoxigenin-11-dUTP是一種堿性穩定的非放射性DNA標記試劑,適用于隨機引物標記、PCR標記、尾部延伸或缺口翻譯等。在隨機引物DNA標記反應或缺口翻譯中,DIG-11-dUTP可以替代dTTP,比例為35% DIG-11-dUTP和65% dTTP。DIG-11-dUTP也可以在PCR標記(例如使用Taq DNA聚合酶)、3'尾部延伸(使用末端轉移酶)和cDNA合成(例如使用Transcriptor或M-MuLV逆轉錄酶)中替代dTTP。它是DNA聚合酶、Taq DNA聚合酶、末端轉移酶和逆轉錄酶的理想底物。標記后的DNA可以隨后使用以下試劑檢測:

-Digoxigenin核酸檢測試劑盒

-Digoxigenin發光檢測試劑盒

 

注意:當這種核苷酸在+15至+25°C下接受0.1-0.5 NaOH處理時,Digoxigenin部分將保持附著。因此,它非常適合用于需要經受堿性處理的Digoxigenin標記DNA。然而,如果您打算制作一個可以通過堿性變性去除的Digoxigenin標記探針(例如,在條帶剝離和重探過程中),請不要使用這種堿性穩定的制劑。相反,應使用堿性敏感型的DIG-11-dUTP。

 

Digoxigenin-11-dUTP的特性與優勢:

Digoxigenin通過一種堿性抗性的醚鍵結合到脫氧尿苷三磷酸上。

抗堿性:在+15至+25°C下,0.1-0.5M NaOH環境中制劑穩定。

 

Digoxigenin-11-dUTP是堿性穩定的,包含1 mM的四鋰鹽溶液。

 

其他注意事項:

僅供生命科學研究使用,不適用于診斷程序。

 

制備說明:

工作溶液:我們建議準備一個包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP(每種10 mM)的脫氧核苷酸混合物;(例如,制備100μl核苷酸混合物,將10μl的dATP、dCTP、dGTP、dTTP(每種)加入到60μl的PCR級水中)。

工作溶液的儲存條件:在15至25°C下,大約4周內可能會發生約5%的分解。

 

質量

典型分析:至少85%的DIG-11-dUTP(HPLC,面積%)。功能通過RPL測試。

 

艾美捷Digoxigenin-11-dUTP,地高辛/二硝基苯酚(NU-803-DIGXS),通過PCR,Nick Translation等應用整合到DNA / cDNA中,用于DNA / cDNA探針的制備,測序等方面。

運輸:通過凝膠包進行運輸。

存儲條件:應在-20°C的環境下保存。

短期(累計最多1周)暴露于室溫下是可行的。

保質期:12個月。

分子式:C43H65N4O21P3(自由酸形式)。

分子量:1066.91克/摩爾(自由酸形式)。

精確質量:1066.34克/摩爾(自由酸形式)。

純度:高于或等于95%(通過高效液相色譜法測定)。

形態:在10 mM Tris-HCl溶液中的過濾溶液,分子量截留30 kDa。

顏色:無色至淡黃色。

濃度:1.0 mM至1.1 mM。

pH值:7.5,誤差范圍±0.5。

光譜特性:zui大吸收波長λmax為290納米,摩爾吸光系數ε為8.8 L·摩爾^-1·厘米^-1(Tris-HCl,pH 7.5)。

 

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