Digoxigenin-11-dUTP，地高辛/二硝基苯酚修飾的核苷酸

Digoxigenin-11-dUTP被酶促摻入DNA/cDNA中作為其天然對應物dTTP的替代物。隨后使用與辣根過氧化物酶（HRP），堿性磷酸酶（AP）或熒光染料綴合的洋地黃毒苷抗體檢測所得的洋地黃毒苷標記的DNA/cDNA探針。通過連接到尿苷C5位的a11原子接頭確保了最佳的底物性質和標記效率。推薦用于PCR和切口翻譯的洋地黃毒苷-11-dUTP/dTTP比率：35%洋地黃毒苷-11-dUTP/65%dTTP

請注意：洋地黃毒苷-11-dUTP的最佳終濃度可能很大程度上取決于應用和測定條件。為了獲得最佳的產品收率和高摻入率，建議對洋地黃毒苷-11-dUTP/dTTP比率進行單獨優化。

Digoxigenin-11-dUTP結構式

艾美捷Digoxigenin-11-dUTP，地高辛/二硝基苯酚（NU-803-DIGXS）：

運輸：通過凝膠包進行運輸。

存儲條件：應在-20°C的環境下保存。

短期（累計最多1周）暴露于室溫下是可行的。

保質期：自交貨之日起12個月。

分子式：C43H65N4O21P3（自由酸形式）。

分子量：1066.91克/摩爾（自由酸形式）。

精確質量：1066.34克/摩爾（自由酸形式）。

純度：高于或等于95%（通過高效液相色譜法測定）。

形態：在10 mM Tris-HCl溶液中的過濾溶液，分子量截留30 kDa。

顏色：無色至淡黃色。

濃度：1.0 mM至1.1 mM。

pH值：7.5，誤差范圍±0.5。

光譜特性：zui大吸收波長λmax為290納米，摩爾吸光系數ε為8.8 L·摩爾^-1·厘米^-1（Tris-HCl，pH 7.5）。

應用：

生物素-11-dUTP可以通過以下方法嵌入到DNA或cDNA中：

使用Taq聚合酶進行聚合酶鏈式反應（PCR）。

利用DNA酶I/DNA聚合酶I進行缺口翻譯（Nick Translation）。

使用Klenow exo-進行引物延伸（Primer Extension）。

使用末端脫氧核苷酸轉移酶（Terminal deoxynucleotidyl Transferase，簡稱TdT）進行3'端標記。

使用MMLV逆轉錄酶進行逆轉錄。

此外，生物素-11-dUTP還可以通過以下方法嵌入到RNA中：

使用末端脫氧核苷酸轉移酶（TdT）進行3'-端標記。

Digoxigenin-11-dUTP，地高辛/二硝基苯酚參考文獻：

[1] Anderson et al. (2005) Incorporation of reporter-labeled nucleotides by DNApolymerases. Biotechniques 38:257.

[2] Jackson et. al (1991) Detection of Shiga Toxin-Producing Shigelladysenteriae Type 1 and Escherichia coli by Using Polymerase Chain Reactionwith Incorporation of Digoxigenin-11-dUTP. J Clin Microbiol. 29 (9):1910.

[3] Dauwerse et al. (1999) Two-colour FISH detection of the inv (16) ininterphase nuclei of patients with acute myeloid leukemia. Br J Haematol106:111.

[4] Wiegant et al. (2008) Probe Labeling and Fluorescence In Situ Hybridization.Current Protocols in Cytometry: Unit 8.3.

[5] Schmitz et al. (2008) Nonradioactive labeling of oligonucleotides in vitrowith the hapten digoxigenin by tailing with terminal transferase. Anal Biochem199:222.

[6] Grimmond et al. (2001) Expression Profiling with cDNA Microarray’s: A User’sPerspective and Guide. In: DNA Microarrays: Gene Expression Applications(Jordan). Springer Verlag Berlin Heidelberg

[7] Rosemeyer et al. (1995) Nonradioactive 3’-end-labeling of RNA molecules ofdifferent lengths by terminal deoxynucleotidyltransferase Anal Biochem224:446.

Digoxigenin-11-dUTP，地高辛/二硝基苯酚相關產品：

HighFidelity Digoxigenin PCR Labeling Kit, #APP-101-DIGX

Digoxigenin NT Labeling Kit, #PP-310-DIGX