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特色產品FluoTag-X4抗GFP是一種由兩種內部開發的單域抗體(sdAbs)混合而成的試劑,能夠以高親和力和特異性識別GFP及其最常見的衍生物上的兩個不同表位。它可直接且特異性地檢測GFP標記的目標,無需使用二抗。
一般信息:20世紀60年代,下村修及其同事在水母Aequorea victoria中發現了一種發光蛋白,這為基于熒光的研究鋪平了道路。然而直到20世紀90年代初,綠色熒光蛋白(GFP)序列才被克隆,并作為熒光標記用于異源生物體中。如今,開源數據庫中已收錄了800多種熒光蛋白變體,其中FPbase提供了全面的收藏。
FluoTag-X4抗GFP由兩種內部開發的單域抗體(sdAbs)混合而成,每種sdAb結合GFP上的不同表位。每個sdAb攜帶兩個熒光團,使GFP標記的目標總共帶有四個熒光團(FluoTag-X4)。這種設計增強了亮度和檢測靈敏度。
FluoTag-X4抗GFP能夠牢固地結合大多數來自Aequorea victoria的熒光蛋白。
艾美捷FluoTag-X4抗GFP AbberiorStar460:
貨號:N0304-Ab460-L
克隆號:1H1,1B2
宿主:羊駝
生產來源:大腸桿菌
應用:
免疫熒光(ICC)
免疫組織化學(IHC)
注意:不建議使用該產品檢測Western blot中的蛋白質,因為sdAb主要識別天然/折疊的蛋白質。
稀釋比例:1:250(相當于每個sdAb克隆的最終濃度為5 nM)
靶標:GFP
特異性:識別GFP(綠色熒光蛋白)及其常見衍生物,如EGFP、mEGFP、Sirius、tSapphire、Cerulean、eCFP、mTurquoise、acGFP、Emerald、超橢圓pHluorin、paGFP、superfolder GFP、eYFP、mVenus和Citrine。
配方:兩種sdAb克隆的混合物,從含有2% BSA(美國來源)的PBS(pH 7.4)中凍干而成。
運輸:常溫運輸
儲存:
含有凍干試劑的安瓿可在2 - 8℃下保存長達12個月。
復溶后,可在-80℃下保存長達6個月。
工作分裝可在-20℃下保存長達4周。
注意事項:僅用于體外/研究目的。無毒、無害、無傳染性。

用FluoTag染色的PFA固定的U2OS-NUP96-GFP穩定細胞系的共聚焦圖像與STED圖像-X4抗GFP與abberior STAR RED(左圖,目錄號NO304-AbRED-L)或abberior STAR ORANGE(右圖,目錄號N0304-AbORANGE-L)結合。FluoTag-X4抗GFPs特異性結合與NUP96融合的GFP,使NUP96核孔蛋白在核孔復合物(NPC)中可視化。與abberior獲取的共聚焦顯微鏡圖像相比,STED圖像以更高的分辨率顯示了精細的結構細節。
文獻參考:
Jacobs T, Isasti Sanchez J, Reger S, Luschnig S. Rho/Rok-dependent regulation of actomyosin contractility at tricellular junctions restricts epithelial permeability in Drosophila. Curr Biol. 2025;35(6):1181-1196.e5. doi:10.1016/j.cub.2025.01.043 (IF; fruit fly)
Macarrón-Palacios V, Hubrich J, do Rego Barros Fernandes Lima MA, Metzendorf NG, Kneilmann S, Trapp M, Acuna C, Patrizi A, D’Este E, Kilimann MW. Paralemmin-1 controls the nanoarchitecture of the neuronal submembrane cytoskeleton. Sci Adv. 2025 Mar 7;11(10):eadt3724. doi: 10.1126/sciadv.adt3724. Epub 2025 Mar 7. PMID: 40053592. (ICC/IF, rat hippocampal primary neurons)
Reinders NR, van der Spek SJF, Klaassen RV, et al. Amyloid-β-Driven Synaptic Deficits Are Mediated by Synaptic Removal of GluA3-Containing AMPA Receptors. J Neurosci. 2025;45(9):e0393242024. Published 2025 Feb 26. doi:10.1523/JNEUROSCI.0393-24.2024 (IF; rat hippocampal neurons)

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