ELISpot專用板子的選擇指南：關乎ELISpot實驗成敗的關鍵細節

在 ELISpot 實驗中，96 孔板常用的膜有兩種：硝酸纖維素（NC）膜和聚偏二氟乙烯（PVDF）膜。NC膜板一經上市，大多數實驗室便立即采用。后來PVDF膜的96孔板問世，研究者改用PVDF，因為PVDF膜提供了更大的膜表面積，從而增加了可以結合的捕獲抗體的量，這一特性對于成功的ELISpot實驗至關重要。

PVDF膜在高倍放大鏡下類似海綿

Mabtech可提供兩種類型的ELISpot培養板：MSIP和MAIPSWU 

1. MSIP--ELISpot培養板

MSIP培養板底部附有塑料保護墊，是用于保護實驗中的PVDF膜，以及避免在操作過程中液體對PVDF膜的污染。MSIP培養板有透明（貨號3654-TP-10）和白色（貨號3654-WP-10）兩種形式可供選擇。這兩種顏色的板子在ELISpot讀板儀中呈現略有不同的外觀，但并不會影響實驗結果。MSIP板的一個關鍵特征是它在左上角有一個“切角”。MSIP板在使用過程中，有如下兩點需要注意：

A. 向每個孔中加入20 ul乙醇（35%）。乙醇在孔中停留時間不超過1分鐘。

B. 在終止顯色時，用去離子水/自來水洗滌各實驗孔前，小心地拆卸底部的保護墊（例如，使用鉗子）。

2. MAIPSWU--ELISpot培養板

MAIPSWU培養板是白色形式(貨號3654-EP-10)的。它沒有底部保護墊，但是底部有一個可拆卸的托盤。MAIPSWU培養板的一個關鍵特點是它在頂部和底部的右上角有兩個“切角”。MAIPSWU板在使用過程中，有如下兩點需要注意：

A. 每孔中加入50?L 70%，乙醇在孔中停留的時間不超過2min。

B. 在洗滌步驟中，可以將培養板從托盤中取出，但在操作過程中要避免液體反滲入PVDF膜的背部和托盤中，從而導致PVDF膜的泄漏或污染。

經常會遇到客戶糾結時選擇白色板子還是透明的板子，其實這只是個人喜好的問題。白色和透明版在酶聯免疫斑點讀板儀上的外觀略有不同，但對點位計數沒有影響的。