Calcein-AM/PI，活細胞/死細胞雙染試劑盒常見問題

Calcein, AM,中文名鈣黃綠素乙酰甲酯,CAS NO:148504-34-1,一種具細胞膜滲透性的活細胞熒光染料,呈綠色熒光(Ex/Em= 490nm/515nm)。AM基團的存在不僅加強疏水性,使其能輕易穿透活細胞膜。而且封閉結合鈣離子的分子部分,本身不發熒光。一旦進入細胞后,被細胞內酯酶水解為鈣黃綠素(calcein),能與胞內鈣離子結合,產生強烈的綠色熒光。因不具有細胞膜滲透性,從而被保留在胞內。與其它活細胞染料(如BCECF-AM,CFDA)相比,Calcein, AM最適合用于活細胞染色探針,因細胞毒性很低,而且不會抑制任何細胞功能如增殖或淋巴細胞趨化性。另外,使用Calcein, AM活性檢測的實驗結果十分可信,與標準的51Cr釋放法所得結果一致。

由于死細胞缺乏酯酶,Calcein, AM僅對活細胞進行標記,這一特征使其非常適合用來檢測細胞活力和細胞的短期示蹤。常常與碘化丙啶PI聯合使用,因其僅能穿過死細胞膜的無序區域到達細胞核,嵌入細胞的DNA雙螺旋區域,并產生紅色熒光(Ex/Em= 535nm/617nm),僅對死細胞染色。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激發,因此可用熒光顯微鏡同時觀察活細胞和死細胞。用545 nm激發,僅可觀察到死細胞。結合這些特點,Calcein, AM和PI經常被結合用作活細胞和死細胞的雙重染色。

本試劑盒就是結合Calcein-AM和PI的雙重染料,來進行活細胞和死細胞的雙重染色標記,從而進行活細胞和死細胞水平的分析。根據試劑盒優化體系,單次以200μl細胞懸液進行染色,可做500次檢測。

艾美捷 Biogradetech Calcein-AM/PI，活細胞/死細胞雙染試劑盒：

中文名稱：Calcein-AM/PI，活細胞/死細胞雙染試劑盒

英文名字：Calcein-AM/PI, Live/Dead Cell Double Staining Kit

Biogradetech貨號：B-CHK103-500T

規格：500T

保存建議：Calcein-AM/PI，活細胞/死細胞雙染試劑盒保存：-20℃干燥避光 有效期一年。

Calcein-AM/PI，活細胞/死細胞雙染試劑盒常見問題：

1、 該試劑盒適用任何細胞類型?

基本上適用于任何含酯酶活性的動物細胞。植物和細菌細胞因含有細胞壁,Calcein-AM不能進入因此無法染色。有可能對原生質體進行染色。

2、 用相同濃度有可能對所有哺乳動物細胞進行染色?

對所有細胞都用相同的濃度是很不合理的。Calcein-AM和PI的最佳工作濃度根據細胞類型差異很大。有必要根據具體細胞來確定最佳染料濃度。參考說明書染料工作濃度優化方法。

3、 Calcein-AM對細胞有毒?

與其他相似的活細胞染料比較,Calcein-AM基本無毒(毒性最小)。

Biogradetech全球生命科學和醫藥研發行業關鍵原料與試劑的領先供應商：Biogradetech成立于2015年，總部位于美國加利福尼亞州，早期以產品技術研發服務起家，逐步發展了廣泛的產品線，并將其商業化銷售，包括蛋白質、抗體、酶、培養基、試劑盒和儀器。適用于細胞生物學、蛋白質組學、分子生物學、免疫學、微生物學、診斷學、生物化學、神經科學、血液分析和高通量藥物篩選等領域。