BioAssay Systems 精氨酸酶抑制劑篩選試劑盒-快速可靠，不到2小時內完成

精氨酸酶（L-精氨酸脲水解酶，EC 3.5.3.1）存在于哺乳動物和植物中。在人類中，精氨酸酶主要在肝臟中表達，也在乳腺、腎臟、睪丸、唾液腺、表皮和紅細胞中少量表達。精氨酸酶催化精氨酸轉化為鳥氨酸和尿素，這一過程對于抵御氨（NH?）毒性以及細胞生長和修復至關重要。過度的精氨酸酶活性與心血管疾病有關，還可能導致血管結構問題和神經毒性。研究表明，精氨酸酶抑制劑在心血管疾病和神經系統疾病的治療中已被證明具有益處。

在研究和藥物發現領域，用于測量精氨酸酶抑制的簡單、直接且適合自動化的程序非常受歡迎。BioAssay Systems的精氨酸酶抑制劑篩選試劑盒提供了一種靈敏且便捷的方法來篩選精氨酸酶抑制劑。該方法利用一種顯色劑，該顯色劑能與精氨酸酶反應中產生的尿素特異性地形成有色復合物。顏色的強度與樣本中的精氨酸酶活性成正比。通過比較經測試化合物預孵育的反應與未經處理的對照反應的顏色強度，可以確定測試化合物的抑制百分比。

作為BioAssay Systems在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產品精氨酸酶抑制劑篩選試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點：

- 安全：非放射性測定。

- 高通量：均質“混合-孵育-測量”型測定，可輕松在高通量篩選液體處理系統上自動化操作。

- 快速可靠：可在不到2小時內完成，無需37攝氏度加熱器。

應用范圍：

- 高通量篩選精氨酸酶抑制劑并評估其效果。

試劑盒組成（96孔板，100次測試）：

- 精氨酸緩沖液（pH 9.5）：1毫升

- 錳溶液：300微升

- 試劑A：12毫升

- 試劑B：12毫升

儲存條件：

- 試劑盒在室溫下運輸。將精氨酸緩沖液儲存于-20攝氏度，其他組分儲存于2-8攝氏度。有效期：收到后12個月。

注意事項：

- 試劑僅供研究使用。使用試劑時應遵循實驗室試劑的常規預防措施。請參閱材料安全數據表以獲取詳細信息。

操作步驟：

- 在測定前將所有試劑平衡至室溫。底物緩沖液和尿素試劑應現配現用，并在2小時內使用完畢。

- 該測定基于酶催化的動力學反應。為確保孵育時間一致，加入工作試劑的操作應迅速，混合應簡短但徹底。建議使用多通道移液器。注意：試劑盒中未包含精氨酸酶或對照抑制劑。

樣本準備：

- 將測試化合物溶解于所選溶劑中。建議先測試所選酶對溶劑的耐受性。

- 以下協議針對人精氨酸酶I進行了優化。使用去離子水將純化的精氨酸酶稀釋至0.0012 U/微升。如果分析其他物種，建議您通過實驗確定Km值，然后調整底物緩沖液中的精氨酸緩沖液體積，使50微升反應中的底物最終濃度接近Km值。

精氨酸酶反應準備：

1. 將40微升精氨酸酶分別加入不同的孔中。

2. 保留兩個含有精氨酸酶的孔，一個用于空白，一個用于對照。

3. 向對照和空白孔中加入5微升測試化合物所溶解的溶劑。例如，如果測試化合物溶解于100體積百分比（v/v%）的DMSO中，則向這些孔中加入5微升100體積百分比（v/v%）的DMSO。

4. 向其余含有精氨酸酶的孔中加入5微升測試化合物。輕拍孔板以混合。

5. 在25攝氏度下孵育孔板15分鐘。

6. 通過混合為每個孔準備足夠的底物緩沖液（SB）：4微升精氨酸緩沖液和2微升錳溶液。向所有樣本孔（除空白孔外）中加入5微升SB。向空白孔中加入5微升去離子水。輕拍孔板以混合。在25攝氏度下孵育孔板30分鐘。

7. 尿素測定：通過混合等體積的試劑A和試劑B來準備尿素試劑。向所有孔中加入200微升尿素試劑。（注意：尿素試劑可終止精氨酸酶反應。）輕拍孔板以混合。在室溫下孵育60分鐘，并在430納米處讀取吸光度。

人精氨酸酶I與100體積百分比（v/v%）DMSO中的不同濃度的ABH共同孵育（在50微升反應中最終DMSO濃度為10體積百分比（v/v%））。

文獻參考：

1. Segal, Robert, et al. (2012) Chronic oral administration of the arginase inhibitor 2 (S)-amino-6-boronohexanoic acid (ABH) improves erectile function in aged rats. Journal of andrology 33.6: 1169-1175.

2. Di Costanzo, Luigi, et al. (2005) Crystal structure of human arginase I at 1.29-? resolution and exploration of inhibition in the immune response.Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 102.37: 13058-13063.

3. Pham, T. N., et al. (2016) Arginase inhibitors: from chlorogenic acid to cinnamides. Planta Medica 81.S01: P482

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區的高新技術生物技術公司，專注于研發、生產和銷售高品質的生化檢測試劑盒，產品種類齊全，主要用于科學研究和生物醫藥開發，以滿足生命科學行業日益增長的需求。BioAssay Systems在現代藥物發現領域擁有超過50年的豐富經驗，已經開發了超過250種用于藥物發現和生命科學研究的檢測試劑盒。產品主要包括：1.血液尿液化學；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

作為BioAssay Systems在中國區域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產品。