幽門螺桿菌IgG ELISA試劑盒檢測原理&測定程序

幽門螺桿菌菌株分為兩大類——既表達VacA又表達CagA的菌株（I型）和既不表達VacA也不產生CagA（II型）的菌株。I型菌株在潰瘍和癌癥患者中占主導地位。高達50%的成年人感染了幽門螺桿菌，但他們中的大多數是漸進的，不會發展成潰瘍。原因是他們感染了II型。80-100%的十二指腸潰瘍患者產生針對128 kd抗原的CagA抗體，而僅患有胃炎的幽門螺桿菌感染者中這一比例為60-63%，這表明對128 kd蛋白的血清學反應在患有十二指腸潰瘍的幽門螺桿桿菌感染者中比沒有消化性潰瘍的感染者更普遍。在發展為癌癥的幽門螺桿菌感染患者中，CagA抗體的敏感性為94%，特異性為93%，表明檢測CagA的抗體是診斷十二指腸潰瘍和癌癥的有用標志物。

Calbiotech幽門螺桿菌（H.pylori）IgG ELISA試劑盒用于檢測人血清和血漿中針對H.pylori的IgG抗體。

艾美捷Calbiotech-幽門螺桿菌IgG ELISA試劑盒：

目錄編號：HP013G

產品類型：酶聯免疫吸附試驗（ELISA）

數量：96次測試（12x8可拆卸條狀孔板）

樣本體積：每孔10微升

物種：人類

儲存與穩定性：產品應儲存在2-8攝氏度。

注意事項：僅供研究使用。不用于診斷程序。

Calbiotech-幽門螺桿菌IgG ELISA試劑盒檢測原理：

將稀釋的患者血清加入涂有純化抗原的孔中。IgG特異性抗體（如果存在）會與抗原結合。將所有未結合的物質洗掉，加入酶偶聯物以結合抗體-抗原復合物（如果存在）。將多余的酶偶聯物洗掉，加入底物。培養板，使酶水解底物。產生的顏色強度與樣品中IgG特異性抗體的量成正比。

測定程序：

將所有樣本和試劑盒試劑放置至室溫（20-25°C）并輕輕混合。

1. 將所需數量的包被條放入支架中。

2. 陰性對照、陽性對照和校準品已準備好使用。通過向200微升樣品稀釋液中加入10微升樣本，制備1:21的樣品稀釋液?；旌暇鶆?。

3. 向相應的孔中分配100微升的稀釋血清、校準品和對照品。對于試劑空白，向1A孔位置分配100微升樣品稀釋液。輕敲支架以去除液體中的氣泡，并混合均勻。在室溫下孵育20分鐘。移除所有孔中的液體。用300微升的1X洗滌緩沖液沖洗孔三次。在吸水紙或紙巾上拍干。

4. 向每個孔中分配100微升的酶綴合物，并在室溫下孵育20分鐘。

5. 從所有孔中移除酶綴合物。用300微升的1X洗滌緩沖液沖洗孔三次。在吸水紙或紙巾上拍干。

6. 向每個孔中分配100微升的TMB底物，并在室溫下孵育10分鐘。加入100微升的終止液。

7. 在15分鐘內使用ELISA讀板儀讀取450納米處的吸光度。建議使用參考濾光片600-650納米的雙波長。

Calbiotech-幽門螺桿菌IgG ELISA試劑盒文獻參考：

1. Cutler AF; Prasad VM; Santogade P. Four-year trends in Helicobacter pylori IgG serology following successful eradication. Am J Med 1998;105(1):18-20  

2. Holtmann G; Talley NJ; Mitchell H; Hazell S. Antibody response to specific H. pylori antigens in functional dyspepsia, duodenal ulcer disease, and health. Am J Gastroenterol 1998; 93(8):1222-7.  

3. Parsonnet J; Replogle M; Yang S; Hiatt R. Seroprevalence of CagA-positive strains among Helicobacter pylori-infected, healthy young adults. J Infect Dis 1997;175(5):1240-2.  

4. Klaamas K; Held M; Wadstr¨om T; Lipping A; Kurtenkov O. IgG immune response to Helicobacter pylori antigens in patients with gastric cancer as defined by ELISA and immunoblotting. Int J Cancer 1996; 67(1):1-5.  

5. Matsukura N; Onda M; Tokunaga A; Kato S; Yoshiyuki T; Hasegawa H; Yamashita K; Tomtitchong P; Hayashi A. Role of Helicobacter pylori infection in perforation of peptic ulcer: an age- and gender-matched case-control study. J Clin Gastroenterol 1997;10:S235-9.   

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