Cytoskeleton G-Actin：F-Actin 體內分析試劑盒的多種用途

確定細胞群中絲狀肌動蛋白 （F-肌動蛋白） 含量與游離球狀肌動蛋白 （G-肌動蛋白） 含量的最可重復和最準確的方法是使用 F-肌動蛋白和 G-肌動蛋白細胞組分的蛋白質印跡定量 （1-4）。一般方法是在F-肌動蛋白穩定緩沖液中勻漿細胞，然后離心以將F-肌動蛋白從G-肌動蛋白池中分離出來。然后用SDS-PAGE分離餾分，并通過蛋白質印跡定量肌動蛋白。最終結果給出了確定細胞骨架中摻入的F-肌動蛋白與細胞質中發現的G-肌動蛋白比例的最準確方法。該試劑盒包含執行該測定所需的所有試劑。  

作為Cytoskeleton全國總代理，艾美捷科技強烈推薦Cytoskeleton熱銷產品G-Actin：F-Actin 體內分析試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。   

Cytoskeleton公司目前主要的產品有340余種，其產品主要覆蓋肌動蛋白，微管蛋白，馬達蛋白，小G蛋白，細胞外基質，活細胞成像等相關領域，提供對應的蛋白質，抗體，檢測與分析試劑盒，并且產品線還在不斷的擴大中。

G-Actin：F-Actin 體內分析試劑盒用途：

研究藥物化合物對G-肌動蛋白與F-肌動蛋白比例的影響。 

研究突變細胞系與其親本細胞系對G-肌動蛋白與F-肌動蛋白比例變化的影響。 

研究環境的物理改變對G-肌動蛋白與F-肌動蛋白比例的影響。

G-Actin：F-Actin 體內分析試劑盒內容：該試劑盒包含足夠的材料，可用于 30-100 次檢測，具體取決于檢測設置，并包括用于陽性和陰性對照的試劑。包括以下組件： 

裂解和F-肌動蛋白穩定緩沖液 ATP （貨號 # BSA04) 

蛋白酶抑制劑混合物（貨號 # PIC02) 

F-肌動蛋白增強對照溶液 

F-肌動蛋白解聚對照溶液 對照 

G-肌動蛋白標準品（貨號 # AKL99) 

抗肌動蛋白單克隆抗體（克隆 7A8.2.1）（貨號 # AAN02-S) 

SDS 樣品緩沖液 （5 x） 二甲基亞胺 

包含詳細協議和廣泛故障排除指南的手冊

G-Actin：F-Actin 體內分析試劑盒示例結果：

在3°C/3%CO 50下，瑞士10T37細胞在DMEM / 5%FBS中生長至2%匯合度。 細胞未經處理（泳道1P和1S）或用0.1μM肌動蛋白聚合藥物茉莉內酯在30°C / 37%CO 5（泳道2P和2S）下處理2分鐘。將細胞裂解并加工成上清液（S）和沉淀（P）級分，并根據G-肌動蛋白/F-肌動蛋白體內檢測試劑盒說明通過蛋白質印跡定量進行分析。

圖1：在未經處理的瑞士3T3細胞中，45%的肌動蛋白是可溶性G-肌動蛋白（1S），55%是不溶性F-肌動蛋白（1P）。這與已發表的數據一致（3）。圖2：在用肌動蛋白聚合藥物茉莉內酯處理的瑞士3T3細胞中，只有5%的肌動蛋白保留在不溶性G-肌動蛋白部分（2S）中，而95%存在于不溶性F-肌動蛋白顆粒部分（2P）中。泳道 50、20 和 10 代表 G-肌動蛋白標準的 50ng、20ng 和 10 ng。M代表分子量標志物（分子量顯示在印跡的右側）。   

引文： 

Milligan R.A. et al. 1990. Molecular structure of F-actin and location of surface binding sites. Nature 348, 217-221. 

Dos Remedios C.G. et al. 2003. Actin binding proteins: regulation of cytoskeletal microfilaments. Physiol. Rev. 83, 433-473. 

Phillips D.R. et al. 1980. Identification of membrane proteins mediating the interaction of human platelets. J. Cell Biol. 86, 77-86. Kim H.R. et al. 2008. 

Cytoskeletal remodeling in differentiated vascular smooth muscle is actin isoform dependent and stimulus dependent. Am. J. Physiol. Cell Physiol. 295, C768-C778. 

Cytoskeleton專注于生物化學和細胞過程研究中的純化蛋白和便捷試劑盒開發與生產。公司提供藥物篩選、信號轉導、蛋白質轉錄后修飾（PTM）、細胞骨架研究相關的系列試劑盒和產品，尤其以細胞骨架相關研究見長，既能滿足于樣品較少的科學研究，也可以用于小規模篩選研究和高通量大規模篩選研究。此外，公司還提供微管蛋白，肌動蛋白，小G蛋白，GAPs，GEFs等現有產品的藥物篩選服務。