BioAssay Systems EnzyChrom 蘋果酸脫氫酶測定試劑盒，方便且適用于高通量檢測

蘋果酸脫氫酶（MDH）（EC 1.1.1.37）是一種酶，能夠在NAD存在的條件下可逆地催化L-蘋果酸氧化為草酰乙酸。 在真核細胞中存在兩種同工酶：MDH1和MDH2。MDH1存在于細胞質中，在將蘋果酸轉運至線粒體的蘋果酸-天冬氨酸穿梭過程中發揮關鍵作用。MDH2是一種線粒體酶，參與三羧酸循環，可逆地將L-蘋果酸轉化為草酰乙酸。在一些神經退行性疾病（如阿爾茨海默?。┲校琈DH活性較高。

BioAssay Systems的非放射性、比色法MDH檢測試劑盒基于NADH偶聯的酶促反應，將四氮唑鹽MTT還原為在565納米處具有最大吸收峰的還原型MTT。 565納米處吸光度的增加與酶活性成正比。

作為BioAssay Systems在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產品EnzyChrom 蘋果酸脫氫酶測定試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點

快速且靈敏。線性檢測范圍（20微升樣品）：在37攝氏度下反應20分鐘，檢測范圍為0.5至65 U/L。

方便且適用于高通量檢測。均質“混合-孵育-測量”型檢測?？奢p松在高通量篩選液體處理系統上自動化操作，每天可處理數千個樣品。

應用

生物樣本（如血漿、血清、紅細胞、組織和培養基）中MDH活性的測定。

試劑盒組成（96孔板，100次檢測）

檢測試劑緩沖液：10毫升

酶A：120微升

NAD/MTT：1毫升

酶B：120微升

底物：600微升

校準液：1.5毫升

儲存條件

試劑盒在運輸過程中使用冰塊包裝。收到后，所有組分應儲存于-20攝氏度。保質期：收到后6個月。

注意事項

試劑僅用于研究。使用試劑時應遵循實驗室試劑的一般安全措施。詳細信息請參閱材料安全數據表。

操作步驟

本檢測基于動力學反應。為確保孵育時間一致，向樣品中加入工作試劑時應迅速，混合應簡短但充分。建議使用多通道移液器?？稍谌魏纹谕臏囟龋ㄈ?5攝氏度或37攝氏度）下進行檢測。

樣品準備

血清和血漿可直接檢測。

組織：在解剖前，用磷酸鹽緩沖液（pH 7.4）沖洗組織以去除血液。將組織（50毫克）在約200微升冷的50毫摩爾/升磷酸鉀緩沖液（pH 7.5）中勻漿。在4攝氏度下以14000×g離心10分鐘。取上清液進行檢測。

細胞裂解液：通過在4攝氏度下以2000×g離心5分鐘收集細胞。對于貼壁細胞，不要使用蛋白酶收獲細胞；而是使用橡膠刮刀。在含有50毫摩爾/升磷酸鉀（pH 7.5）的冷緩沖液中適當體積中勻漿或超聲細胞。在4攝氏度下以14000×g離心10分鐘。取上清液進行檢測。

所有樣品可在-20至-80攝氏度下至少保存一個月。

試劑準備

將試劑平衡至期望的反應溫度（建議37攝氏度）。使用前短暫離心試管。

文獻參考：

1. Venkat, S. et al (2017). Genetically encoding thioacetyl-lysine as a non-deacetylatable analog of lysine acetylation in Escherichia coli.FEBS open bio, 7(11), 1805-1814.

2. Gan, Q et al (2016). Expanding the genetic code of Salmonella with noncanonical amino acids. Sci Rep 6, 39920.

3. Trivedi, AK et al (2015). Adaptation of oxidative phosphorylation to photoperiod-induced seasonal metabolic states in migratory songbirds.Comp. Biochem. Physiol. A 184: 34-40. 

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區的高新技術生物技術公司，專注于研發、生產和銷售高品質的生化檢測試劑盒，產品種類齊全，主要用于科學研究和生物醫藥開發，以滿足生命科學行業日益增長的需求。BioAssay Systems在現代藥物發現領域擁有超過50年的豐富經驗，已經開發了超過250種用于藥物發現和生命科學研究的檢測試劑盒。產品主要包括：1.血液尿液化學；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

作為BioAssay Systems在中國區域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產品。