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特色產品法尼基轉移酶(FTase,EC 2.5.1.58)催化法尼基焦磷酸鹽將法尼基團轉移到靶蛋白C末端的半胱氨酸殘基上。如果調節不當,法尼基化蛋白(包括Ras超家族的小GTP酶)可能導致發育障礙和癌癥。簡單、直接且高通量的活性檢測方法在癌癥研究中應用廣泛,而BioAssay Systems的EFTS-400檢測試劑盒提供了一種方便的熒光法用于檢測FTase活性。在此檢測中,FTase與法尼基焦磷酸鹽和丹磺酰肽底物反應,釋放出可通過熒光(激發波長/發射波長=340/550 nm)檢測的產物。
作為BioAssay Systems在中國的區域總代理,艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產品【干冰】EnzyFluo 法尼基轉移酶活性測定試劑盒。產品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
| 產品名稱 | 貨號 | 詳情 |
【干冰】EnzyFluo 法尼基轉移酶活性測定試劑盒 | BAS-EFTS-400 | 查看 |
主要特點
安全便捷。非放射性檢測?!盎旌?孵育-測量”型檢測。無需洗滌和試劑轉移步驟。
靈敏準確。在384孔板檢測中,FTase的線性檢測范圍為0.024–3.2 U/L。
高通量。可輕松自動化,每天檢測數千個樣本。
應用
用于定量測定生物樣本中的FTase酶活性。
操作步驟
本檢測基于酶催化的動力學反應。為確保孵育時間一致,加入工作試劑應迅速,混合應簡短但充分。推薦使用多通道移液器。注意:試劑盒中不包含FTase酶。
試劑準備:使用黑色平底384孔板。檢測前,將所有組分平衡至室溫,并在打開前短暫離心試管。每次檢測應新鮮配制工作試劑。
酶準備:酶應在緩沖液中配制并新鮮使用。建議通過實驗確定每孔使用的最佳酶量。
384孔板FTase活性檢測
1. 將5 uL樣本分別轉移至不同的孔中。
2. 通過混合每孔0.5 uL底物、30 uL檢測緩沖液和1 uL TCEP,為所有樣本孔配制足夠的工作試劑(WR)。向所有樣本孔中加入25 uL WR。立即輕拍孔板以混合。
3. 在時間零點和60分鐘時讀取熒光強度(激發波長/發射波長=340/550 nm),或連續60分鐘動態讀取熒光。

文獻參考:
[1]. Hougland, James et al (2010). Identification of novel peptide substrates for protein farnesyltransferase reveals two substrate classes with distinct sequence selectivities. Journal of Molecular Biology: 395(1),176-190.
[2] Long, Stephen et al (2001). The crystal structure of human protein farnesyltransferase reveals the basis for inhibition by CaaX tetrapeptides and their mimetics: PNAS: vol. 98(23) 12948-12953.
[3]. Rowinsky, EK et al (1999). Ras protein farnesyltransferase: A strategic target for anticancer therapeutic development. J Clin Oncol:17(11), 3631-52.
BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區的高新技術生物技術公司,專注于研發、生產和銷售高品質的生化檢測試劑盒,產品種類齊全,主要用于科學研究和生物醫藥開發,以滿足生命科學行業日益增長的需求。BioAssay Systems在現代藥物發現領域擁有超過50年的豐富經驗,已經開發了超過250種用于藥物發現和生命科學研究的檢測試劑盒。產品主要包括:1.血液尿液化學;2.酶活性測定;3.能量代謝;4.氧化應激;5.高通量HTS試劑;6.陰陽離子檢測。
作為BioAssay Systems在中國區域的代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產品。

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