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特色產品葡萄糖攝取有多種方法和轉運蛋白,取決于細胞類型的代謝需求以及葡萄糖的可用性。有超過十種不同的易化擴散葡萄糖轉運蛋白,它們可以在不消耗ATP的情況下,將葡萄糖沿著濃度梯度運輸。在腎臟中,次級主動運輸被用于逆濃度梯度攝取葡萄糖,以確保尿液中幾乎不排出葡萄糖。
BioAssaySystems的熒光細胞基礎葡萄糖攝取測定法使用2-脫氧葡萄糖(2-DG),這是一種廣泛使用的葡萄糖類似物,因為它可以被葡萄糖轉運蛋白攝取,并被內源性己糖激酶代謝為2-脫氧葡萄糖-6-磷酸(2-DG6P)。2-DG6P會在細胞內積累,因為它不是磷酸葡萄糖異構酶(糖酵解的下一步)的合適底物。細胞被裂解后,加入過量的NADP和葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PDH),以代謝2-DG6P并生成等摩爾量的NADPH。然后通過G6PDH循環反應測量NADPH,以放大信號并產生可測量的熒光信號,激發波長/發射波長為530/585nm,與2-DG6P的濃度成正比。
作為BioAssay Systems在中國的區域總代理,艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產品【干冰】EnzyFluo 葡萄糖攝取測定試劑盒。產品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
| 產品名稱 | 貨號 | 詳情 |
【干冰】EnzyFluo 葡萄糖攝取測定試劑盒 | BAS-EFGU-100 | 查看 |
主要特點
-安全。不使用放射性物質。
-靈敏且準確。檢測限為0.1uM,線性范圍可達5uM2-DG6P。
-簡單便捷??勺鳛橹型考毎咸烟寝D運測定法實現自動化。
應用
-測定完整細胞中的葡萄糖攝取。
-評估配體或藥物對葡萄糖轉運的影響。
試劑盒組成
-測定緩沖液:10mL
-G6P試劑:1.5mL
-酶A:120uL
-酶B:120uL
-2-DG底物:1.2mL
-NADP:120uL
-2-DG6P標準品:120uL
-探針:750uL
-NADP/NADPH提取緩沖液:各12mL
儲存條件
-將所有試劑儲存于-20°C。自收到之日起有效期為6個月。
注意事項
-試劑僅供研究使用。使用試劑時應遵循實驗室試劑的常規安全措施。詳細信息請參閱材料安全數據表。
PANC-1細胞中的葡萄糖轉運測定實驗
細胞按照協議進行接種、饑餓和處理。左側:在有無1mM苯甲酸的存在下,PANC-1細胞的梯度實驗。右側:苯甲酸對葡萄糖轉運的抑制曲線。PANC-1細胞以每孔10,000個細胞的密度進行接種。

文獻參考:
1. Liu, Meihan, et al (2019). Activation of AMPK by metformin promotes renal cancer cell proliferation under glucose deprivation through its interaction with PKM2. International Journal of Biological Sciences 15.3:617-627.
2. Park, Seong-Hoon, et al(2016). SIRT2-mediated deacetylation and tetramerization of pyruvate kinase directs glycolysis and tumor growth.Cancer research 76.13: 3802-3812.
3. Tunduguru, Ragadeepthi (2016). Regulation of skeletal muscle insulin sensitivity by PAK1. Dissertation. Assay: Glucose uptake in rat cells.
BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區的高新技術生物技術公司,專注于研發、生產和銷售高品質的生化檢測試劑盒,產品種類齊全,主要用于科學研究和生物醫藥開發,以滿足生命科學行業日益增長的需求。BioAssay Systems在現代藥物發現領域擁有超過50年的豐富經驗,已經開發了超過250種用于藥物發現和生命科學研究的檢測試劑盒。產品主要包括:1.血液尿液化學;2.酶活性測定;3.能量代謝;4.氧化應激;5.高通量HTS試劑;6.陰陽離子檢測。
作為BioAssay Systems在中國區域的代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產品。

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