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特色產品絲裂原活化蛋白激酶(MAPK/ERK)通路在細胞增殖、分化和遷移中起著關鍵作用。絲裂原的刺激最終會導致ERK1(T202/Y204)和ERK2(T185/Y187)的磷酸化。MAPK/ERK級聯反應為癌癥治療藥物的開發提供了許多有趣的靶點。
BioAssaySystems的基于細胞的ELISA檢測方法可以直接在完整細胞中測量雙重磷酸化的ERK1/2,并將信號與細胞總蛋白含量進行標準化。這種簡單高效的檢測方法省去了細胞裂解液制備的步驟,可用于研究激酶信號傳導以及激酶抑制劑對細胞的影響。在此檢測中,細胞在96孔板中培養,并用配體或藥物處理。隨后,細胞在孔中固定并透化。通過熒光ELISA檢測ERK1/2的磷酸化(pERK),然后測量每個孔中的總蛋白含量。
作為BioAssay Systems在中國的區域總代理,艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產品【干冰】EnzyFluo ERK磷酸化測定試劑盒。產品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
| 產品名稱 | 貨號 | 詳情 |
【干冰】EnzyFluo ERK磷酸化測定試劑盒 | BAS-EERK-100 | 查看 |
主要特點
-全新升級。檢測總時間從標準的21小時縮短至6.5小時(實際操作時間為2.5小時)。
-簡單便捷。細胞直接在96孔板中培養,無需細胞裂解。
-準確且高通量。在同一孔中將蛋白磷酸化水平與細胞總蛋白進行標準化,極大地減少了孔間差異。可輕松自動化為高通量96孔板檢測,每天可處理數千個樣本。
應用
-用于培養細胞中ERK1/2磷酸化狀態的定量熒光免疫酶聯檢測。
-評估配體或藥物對ERK磷酸化的影響。
-已測試物種:人、小鼠、大鼠。
試劑盒組成
-洗滌緩沖液原液:25mL
-封閉緩沖液:25mL
-蛋白染色液:6mL
-染料試劑:120uL
-Ab1抗體:10uL
-Ab2(gM-HRP)抗體:10uL
儲存條件:將所有試劑儲存于-20°C。有效期為自收貨之日起6個月。
注意事項:試劑僅供研究使用。使用試劑時需遵循實驗室試劑的常規注意事項。請參閱材料安全數據表以獲取詳細信息。
實驗結果示例
-左圖:PANC-1細胞經佛波醇酯(PMA)處理后ERK1/2磷酸化的動力學曲線。
-右圖:激酶抑制劑索拉非尼對ERK1/2磷酸化的抑制作用。細胞先用藥物處理3小時,然后用PMA處理5分鐘。RBL-2H3、NIH3T3和PANC-1細胞系的IC??值分別為2.1uM、11.4uM和11.5uM。

文獻參考:
1. Cobb MH, et al (1994). The mitogen-activated protein kinases, ERK1 and ERK2. Semin Cancer Biol. 5(4):261-268.
2. Daniluk J, Dabrowski A. (2007). The effect of concomitant stimulation with cholecystokinin and epidermal growth factor on extracellular signalregulated kinase (ERK) activity in pancreatic acinar cells. J Physiol Pharmacol. 58(3):441-53.
3. Iqbal J, et al (2007). Rapid in vivo effects of estradiol-17beta in ovine pituitary gonadotropes are displayed by phosphorylation of extracellularly regulated kinase, serine/threonine kinase, and 3',5'-cyclic adenosine 5'-monophosphate-responsive element-binding protein. Endocrinology 148 (12): 5794-802.
BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區的高新技術生物技術公司,專注于研發、生產和銷售高品質的生化檢測試劑盒,產品種類齊全,主要用于科學研究和生物醫藥開發,以滿足生命科學行業日益增長的需求。BioAssay Systems在現代藥物發現領域擁有超過50年的豐富經驗,已經開發了超過250種用于藥物發現和生命科學研究的檢測試劑盒。產品主要包括:1.血液尿液化學;2.酶活性測定;3.能量代謝;4.氧化應激;5.高通量HTS試劑;6.陰陽離子檢測。
作為BioAssay Systems在中國區域的代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產品。

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