BioAssay Systems【干冰】EnzyFluo 膠原蛋白檢測試劑盒操作步驟說明

膠原蛋白是結締組織的關鍵結構蛋白，也是哺乳動物體內最豐富的蛋白質。它有許多不同種類和形式，其中I型到V型最為常見。除了在體內發揮的關鍵作用外，它還有許多醫學應用，例如在重建手術（包括骨骼和皮膚移植）中的使用。由于其抗衰老和皮膚修復特性，它還被廣泛用于化妝品。目前用于定量檢測膠原蛋白的檢測方法從需要使用酸和堿進行廣泛水解處理到使用昂貴的抗體和復雜的協議不等。

BioAssaySystems的膠原蛋白檢測試劑盒提供了一種非常簡單、安全且靈敏的方法來定量檢測樣本中的膠原蛋白。在此程序的第一步中，樣本中的膠原蛋白被酶消化成肽段。隨后，含有N端甘氨酸的肽段與染料試劑反應形成熒光復合物。該產物的熒光強度在λex/em=375/465nm處測量，與樣本中的膠原蛋白濃度成正比。

作為BioAssay Systems在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產品【干冰】EnzyFluo 膠原蛋白檢測試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點

-安全。非放射性檢測。

-靈敏且準確。使用20uL樣本。96孔板檢測的線性檢測范圍為2ug/mL到50ug/mL膠原蛋白。

-便捷且高通量?！凹訕?混合-讀取”型檢測。無需洗滌和試劑轉移步驟?？奢p松自動化，每天可處理數千個樣本。

應用

-直接檢測：生物樣本和化妝品中的膠原蛋白。

試劑盒組成（96孔板，100次檢測）

-染料試劑：5mL

-膠原蛋白標準品：40uL（3mg/mL）

-緩沖液：5mL

-顯色劑：1mL

-消化酶：70uL

儲存條件：試劑盒在運輸過程中使用冰袋冷藏。收到后，請將試劑盒組分儲存于-20°C。有效期：自收到之日起6個月。

注意事項：試劑僅供研究使用。打開前短暫離心試劑管。檢測前將所有組分恢復至室溫。使用試劑時，請遵循實驗室試劑的常規操作注意事項。詳細信息請參考材料安全數據表。

操作步驟：

樣本準備：此檢測針對低水平膠原蛋白的檢測進行了優化。由于檢測的靈敏度和膠原蛋白的豐富性，通常需要較大的稀釋倍數才能將樣本置于本試劑盒的線性檢測范圍內。強烈建議進行系列稀釋以確定某種樣本的最佳稀釋倍數。生物液體樣本（如血清、細胞裂解液、組織裂解液）首先離心以去除任何顆粒。可能需要進行系列稀釋以確定每種樣本在此檢測中的最佳稀釋倍數。

左圖：96孔板檢測中的標準曲線

右圖：有（+）和無（-）消化酶的膠原蛋白樣本。

A）30ug/mL膠原蛋白標準品。

B）EssentialWholesaleMarineCollagen，稀釋250倍。

C）大鼠血清，稀釋20倍（2.7mg/mL蛋白質）。

D）牛血清，稀釋10倍（7.0mg/mL蛋白質）。

E）人血清，稀釋20倍（3.14mg/mL蛋白質）。

文獻參考：

1. Inoue, Y., et al (2012). Accelerating effect of soy peptides containing collagen peptides on type I and III collagen levels in rat skin. Biosci Biotechnol Biochem 76(8): 1549-51.

2. Kinoshita, J., et al (2010). Type IV collagen levels are elevated in the serum of patients with peritoneal dissemination of gastric cancer.Oncol Lett 1(6): 989-994.

3. Seo, H.Y., et al. (2014). Phospholipase D1 decreases type I collagen levels in hepatic stellate cells via induction of autophagy. Biocehm Biophys Res Commun 449(1): 38-43.

4. Di Lulio, G.A., et al (2002). Mapping the ligand-binding sites and disease associated mutations on the most abdundant protein in the human, type I collagen. J Biol Chem 277 (6): 4223-4231. 

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區的高新技術生物技術公司，專注于研發、生產和銷售高品質的生化檢測試劑盒，產品種類齊全，主要用于科學研究和生物醫藥開發，以滿足生命科學行業日益增長的需求。BioAssay Systems在現代藥物發現領域擁有超過50年的豐富經驗，已經開發了超過250種用于藥物發現和生命科學研究的檢測試劑盒。產品主要包括：1.血液尿液化學；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

作為BioAssay Systems在中國區域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產品。