Advanced BioMatrix-ECM Select 陣列套件Ultra-36解決方案

ECM Select Array Kit Ultra-36是一種細胞外基質篩選陣列，包含一片功能化了專有水凝膠的顯微鏡玻璃載玻片。36種細胞外基質（ECM）條件被印刷成陣列點位，全部來自人源。每個點位直徑為400微米，以9個復制品的形式印刷（圖1）。ECM被局限在每個點位內，不與相鄰點位交叉擴散，因此每個點位代表一個獨立的“孔”或實驗。哺乳動物細胞在體內存在著影響其行為（增殖、分化、死亡等）和功能的獨特微環境。在體外培養細胞時，必須重現這種微環境以實現生理相關的生長。在影響細胞在體內行為的眾多因素中，細胞外基質（ECM）在確定細胞功能方面起著重要作用。目前，尋找適用于細胞培養的合適ECM是一個試錯過程，需要大量的細胞以及顯著的時間和成本投入。ECM Select Array Kit Ultra-36允許以較少的細胞數量在短時間內并行篩選36種ECM和ECM組合。感興趣的細胞被接種到帶有4個培養腔的載玻片上（附帶提供），并在孵育箱中培養所需的時間?？梢允褂昧翀鲲@微鏡觀察細胞形態、附著和生長。通過使用特定熒光標記物對載玻片上的細胞進行染色，可以監測特定的細胞行為。熒光信號可以通過熒光顯微鏡成像系統進行檢測。

與在多孔組織培養板中執行相同實驗相比，艾美捷Advanced BioMatrix ECM Select Array Kit Ultra-36使用簡單。細胞接種、固定、洗滌和處理步驟都在一個單一的溶液交換中完成，消除了多孔板處理的步驟。對于大多數細胞類型，從開始到結束，確定適用于培養細胞的合適ECM可以在不到24小時內完成。

ECM Select 陣列套件 Ultra-36參數說明：

注意事項和免責聲明：本品僅供研究和開發使用，不適用于人體或其他用途。

存儲、保質期和穩定性ECM Select Ultra Array Kit的保質期在-10至-30°C下至少為12個月。保質期測試正在進行中。不建議重復凍結和解凍，但有限的凍結和解凍似乎對產品沒有負面影響。不建議在更低的溫度下存儲。

根據我們的穩定性研究，ECM Select Ultra Array Kit在2至8°C下儲存3-4天時表現良好。然而，經過2周在2至8°C下儲存后，一些細胞外基質條件的細胞附著能力會降低。在2至8°C下儲存1個月后，載玻片上幾乎所有的ECM條件都失去了細胞附著能力。

操作步驟將細胞接種到載玻片上：

1. 準備250,000個所需的細胞，用5毫升完整的培養基（細胞密度為50,000個細胞/毫升）。

2. 從-20°C的冷凍機中取出ECM Select Ultra Array Kit，放在無菌層流罩下。打開鋁箔袋，取出鋁箔袋中的內容。首先，將培養皿從塑料袋中取出并取下蓋子。然后打開載玻片架上的蓋子，輕輕將載玻片從載玻片架上取下。將載玻片放入培養皿的一個腔中。在取下載玻片時要小心，使用無菌技術，如戴無菌手套或使用無菌鑷子，并且只觸摸載玻片的邊緣。確保印刷的斑點面朝上（載玻片上的數字和字母應清晰可見）。

3. 在載玻片上加入5毫升無菌磷酸鹽緩沖液（PBS）。確保整個載玻片浸沒在PBS溶液中，并避免在載玻片下方困住氣泡。輕輕搖晃載玻片幾次，然后吸去PBS溶液。不要觸摸載玻片表面。

4. 加入5毫升所需的培養基（與培養細胞相同的培養基），確保整個載玻片浸沒在培養基中。輕輕搖晃載玻片幾次，然后吸去培養基溶液。不要觸摸載玻片表面。

5. 輕輕振動移液器，簡短地將準備好的250,000個細胞上下吸取，并立即將細胞直接加到載玻片上。在分配細胞時，通過來回移動移液器來均勻分布細胞。不要觸摸載玻片表面。將蓋子蓋回培養皿上。

6. 小心地將含有載玻片的4孔培養皿轉移到孵育箱中，在37°C、5% CO2下培養細胞過夜（最少12小時以確保高效的細胞附著，最多3天）。

注意事項：當從載玻片架上取下載玻片時，載玻片表面可能可見陣列斑點。用PBS/培養基洗滌后，這些斑點可能會消失。這是正常的，不會影響ECM陣列的性能。

注意事項：對于細胞系，12小時應足夠觀察到細胞附著。對于從組織中新鮮分離的細胞或之前凍存的細胞，可能需要多達2天才能觀察到顯著的細胞附著。

注意事項：如果需要進行細胞增殖研究，請減少細胞數量，以便在斑點上留出額外的空間供細胞分裂。建議根據細胞的大小和形態，從100,000-150,000個細胞開始。細胞越大，所需細胞數量越少。

美國Advanced BioMatrix是3D組織培養、細胞檢測和細胞增殖等領域實驗解決方案的佼佼者，在分離、純化、凍干、細胞培養和蛋白檢測、多肽粘附、附著因子、基質硬度和其他3D matrix 產品開發方面有著豐富的經驗。