BioAssay Systems【干冰】EnzyFluo AMPK磷酸化檢測試劑盒-高效檢測細胞代謝調控

5-AMP激活的蛋白激酶（AMPK）是細胞內能量平衡的關鍵感應器。AMPK在AMP/ATP比值升高時被激活，這種比值升高可能由多種因素引起，例如肌肉收縮、饑餓或缺氧。AMPK是一種由α-（63kDa）、β-（38kDa）和γ-（38kDa）亞基組成的異源三聚體蛋白復合物。每個亞基都已鑒定出同工型（α1、α2、β1、β2、γ1、γ2、γ3），理論上可以形成12種不同的蛋白。α-亞基包含一個絲氨酸/蘇氨酸激酶結構域，調節亞基包含AMP和ATP（γ-亞基）以及糖原（β-亞基）的結合位點。

AMPK通過催化結構域內Thr-172位點的磷酸化被激活。AMP結合會使AMPK活性比基礎水平增加2至5倍。AMP與γ-亞基結合會導致激酶的變構激活，并在激酶結構域中誘導構象變化，保護AMPK免受Thr-172的去磷酸化。BioAssaySystems的基于細胞的ELISA檢測可測量完整細胞中的磷酸化AMPK，并將信號與總蛋白含量進行標準化。該抗體能夠識別兩種α-亞基，因此可用于來自所有組織（人類、小鼠、大鼠）的細胞。這種簡單高效的檢測方法免去了細胞裂解液的制備，并可用于短期和長期檢測中AMPK調控的研究。在此檢測中，生長在96孔板中的細胞在孔內被固定并通透化。使用熒光ELISA測量AMPK磷酸化（pAMPK），隨后測量每個孔中的總蛋白。

作為BioAssay Systems在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產品【干冰】EnzyFluo AMPK磷酸化檢測試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點

-靈敏：可在每孔少至500個細胞中測量pAMPK的調節。

-改進升級：將標準的21小時總檢測時間縮短至6.5小時（實際操作時間為2.5小時）。

-簡單便捷：細胞直接在96孔板中培養，無需細胞裂解。

-準確且高通量：將蛋白質磷酸化水平與同一孔中的總細胞蛋白進行標準化，極大地減少了孔間差異?？奢p松自動化為高通量96孔板檢測，每天可處理數千個樣本。

應用

-定量熒光免疫酶檢測：用于培養細胞中AMPK磷酸化狀態的檢測。

-評估直接和間接調節AMPK磷酸化：已測試物種包括人類、小鼠和大鼠。

試劑盒組成

-洗滌緩沖液：25mL

-封閉緩沖液：25mL

-蛋白染色液：6mL

-染料試劑：120?L

-Ab1：10?L

-Ab2（gR-HRP）：10?L

儲存條件

試劑盒在運輸過程中使用冰袋。收到后，請將所有試劑儲存于-20°C。保質期為收到后6個月。

注意事項

試劑僅供研究使用。使用試劑時應遵循實驗室試劑的常規預防措施。請參閱材料安全數據表以獲取詳細信息。

左側：二甲雙胍誘導 PANC-1 細胞中 AMPK 磷酸化的時間過程。

右側：PANC-1 細胞在二甲雙胍處理 3 小時后的 AMPK 磷酸化劑量反應曲線。未處理的 PANC-1 細胞中的基礎 AMPK 磷酸化水平定義為 100%。

文獻參考：

1. Tsuda, Yuichi, et al (2017). Trypsin-Treated beta-Lactoglobulin Improves Glucose Tolerance in C57BL/6 Mice by Enhancing AMPK Activation and Glucose Uptake in Hepatocytes.. Biological and Pharmaceutical Bulletin 40.11: 1917-1922.

2. Chen, Hu, et al (2019). 6PGD inhibition sensitizes hepatocellular carcinoma to chemotherapy via AMPK activation and metabolic reprogramming. Biomedicine & Pharmacotherapy 111: 1353-1358.

3. Cao, J. et al (2020). 6PGD Upregulation is Associated with Chemo-and Immuno-Resistance of Renal Cell Carcinoma via AMPK SignalingDependent NADPH-Mediated Metabolic Reprograming. The American journal of the medical sciences, 360(3), 279-286. 

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區的高新技術生物技術公司，專注于研發、生產和銷售高品質的生化檢測試劑盒，產品種類齊全，主要用于科學研究和生物醫藥開發，以滿足生命科學行業日益增長的需求。BioAssay Systems在現代藥物發現領域擁有超過50年的豐富經驗，已經開發了超過250種用于藥物發現和生命科學研究的檢測試劑盒。產品主要包括：1.血液尿液化學；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

作為BioAssay Systems在中國區域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產品。