豬IgG ELISA試劑盒，覆蓋血清、血漿、初乳等，滿足多種樣本定量需求

一、產品概述

由艾美捷Bethyl Laboratories推出的本產品（貨號：E101-104）是一款基于雙抗夾心法開發的豬IgG酶聯免疫吸附檢測（ELISA）試劑盒，由美國制造，適用于豬血清、血漿、初乳及乳汁樣本中IgG含量的定量檢測。試劑盒采用生物素鏈霉親和素辣根過氧化物酶（BiotinStreptavidinHRP）檢測系統，檢測范圍為0.69  500 ng/ml，靈敏度高，特異性強，是豬免疫狀態評估、初乳質量監控及疫苗研究等領域的重要工具。

二、技術規格

參數 | 詳細信息

靶標 | 豬IgG

反應性 | 豬

應用 | ELISA

檢測范圍 | 0.69  500 ng/ml

樣本類型 | 血清、血漿、初乳、乳汁

檢測方法 | 生物素化鏈霉親和素HRP

實驗類型 | 雙抗夾心ELISA

保存條件 | 28°C

有效期 | 收貨后6個月

三、試劑盒組分

組分名稱 | 規格 | 數量

豬IgG預包被96孔可拆板 | 1塊 | 1

豬IgG標準品 | 1000 ng/瓶 | 2瓶

豬IgG檢測抗體 | 12 ml | 1瓶

10×稀釋緩沖液B | 25 ml | 1瓶

HRP溶液A | 12 ml | 1瓶

TMB底物液 | 12 ml | 1瓶

終止液 | 12 ml | 1瓶

20×洗滌緩沖液 | 50 ml | 1瓶

封板膜 | 6張 | —

四、產品背景

免疫球蛋白G（IgG）是豬血液/血漿中含量最高的免疫球蛋白，在體液免疫應答中發揮核心作用。其主要功能包括：

中和毒素：結合并中和細菌外毒素及病毒

激活補體：通過經典途徑激活補體系統，介導病原體裂解

調理作用：標記病原體，促進吞噬細胞攝取和清除

抗體依賴細胞介導的細胞毒性：招募NK細胞等效應細胞殺傷靶細胞

在母豬初乳中，IgG含量極高（可達50 mg/ml以上），是新生仔豬被動免疫的主要來源。檢測初乳及乳汁中IgG水平，可評估母源抗體傳遞效率；監測血清/血漿IgG濃度，則有助于判斷豬群免疫狀態及疫苗應答效果。

五、檢測原理

本試劑盒采用雙抗夾心ELISA法，具體流程如下：

1.包被：酶標板孔內已預包被抗豬IgG捕獲抗體

2.加樣：加入標準品或待測樣本，樣本中的豬IgG與捕獲抗體結合

3.檢測：加入生物素標記的抗豬IgG檢測抗體，形成“捕獲抗體豬IgG檢測抗體”復合物

4.信號放大：加入HRP標記的鏈霉親和素，與生物素高效結合

5.顯色：加入TMB底物，HRP催化底物產生藍色產物

6.終止：加入終止液，顏色變為黃色

7.讀板：在450 nm波長處測定吸光度，信號強度與樣本中IgG濃度呈正比

六、操作步驟

樣本準備

血清/血漿：采集后避免溶血，可28°C短期保存（≤7天），長期保存需20°C凍存。使用前用1×稀釋緩沖液B進行適當稀釋（建議預實驗確定最佳稀釋倍數，典型稀釋比為1:1000  1:10000）

初乳/乳汁：樣本可能含有較高脂肪和蛋白，建議離心（10,000 × g，10分鐘，4°C），取澄清中間層進行稀釋檢測。初乳樣本需大倍數稀釋（典型稀釋比1:10000  1:100000）

試劑準備

洗滌緩沖液：將50 ml 20×洗滌緩沖液用去離子水稀釋至1000 ml，混勻備用

1×稀釋緩沖液B：將25 ml 10×稀釋緩沖液B用去離子水稀釋至250 ml，混勻備用

標準品：取1瓶標準品（1000 ng/瓶），加入1 ml 1×稀釋緩沖液B，輕輕混勻，配制成1000 ng/ml的母液。然后進行7次2倍梯度稀釋，獲得500、250、125、62.5、31.25、15.625、7.8125、3.90625、1.953125、0.9765625、0.48828125 ng/ml等濃度。建議設置0 ng/ml空白對照（僅稀釋緩沖液）

加樣與孵育

1. 從密封袋中取出預包被板，設定標準品孔、空白孔和樣本孔

2. 每孔加入100 μl標準品或稀釋后的樣本，空白孔加入100 μl 1×稀釋緩沖液B

3. 用封板膜密封，室溫（2025°C）孵育60分鐘（或4°C過夜孵育）

4. 棄去孔內液體，每孔加入300 μl 1×洗滌緩沖液，洗滌35次，最后一次在吸水紙上拍干

檢測抗體孵育

1. 每孔加入100 μl 豬IgG檢測抗體（已含生物素，即用型）

2. 更換新封板膜，室溫孵育60分鐘

3. 重復洗滌步驟（35次）

HRP孵育

1. 每孔加入100 μl HRP溶液A（即用型）

2. 室溫孵育30分鐘

3. 重復洗滌步驟（5次，最后一次拍干）

顯色與終止

1. 每孔加入100 μl TMB底物液

2. 室溫避光孵育1520分鐘（或至標準品最高濃度孔出現明顯藍色）

3. 每孔加入100 μl 終止液，輕輕震蕩混勻，藍色變為黃色

讀板

使用酶標儀在450 nm波長處讀取各孔吸光度（OD值）。建議在終止后30分鐘內完成讀數。