BioAssay Systems 透明質酸酶抑制劑篩選試劑盒- 高通量篩選用于評估透明質酸酶抑制劑

透明質酸酶是一類能夠催化糖胺聚糖透明質酸降解的酶。透明質酸是生物體細胞外基質的主要成分之一，它在細胞增殖和遷移中發揮重要作用。透明質酸酶在分解細胞增殖的關鍵因素——透明質酸中的作用，使其成為癌癥治療的潛在靶點。一種假設是，增加透明質酸酶的活性可能通過分解腫瘤擴張所需的細胞外基質來阻止腫瘤侵襲。相反，降低透明質酸酶活性可能通過阻止癌細胞從原發腫瘤中逃逸來防止轉移。關于透明質酸酶在癌癥病理學中確切作用的研究仍在進行中。

BioAssay Systems的透明質酸酶抑制劑篩選試劑盒采用兩步比濁法反應，通過測量被水解的透明質酸的量來測定透明質酸酶的活性。一種終止試劑會停止酶促反應，并與孔中殘留的透明質酸形成濁度。在600 nm處的濁度降低與樣本中的透明質酸酶活性成正比。

作為BioAssay Systems在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產品透明質酸酶抑制劑篩選試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點

- 快速可靠。整個檢測可在30分鐘內完成。

- 簡單便捷。操作簡單，僅涉及酶促反應和終止試劑的加入，無需洗滌或試劑轉移步驟。

- 穩健且適用于高通量篩選?？稍诟咄亢Y選液體處理系統上輕松自動化，每天可處理數千個樣本。

應用

- 高通量篩選用于評估透明質酸酶抑制劑。

試劑盒組成（96孔板100次檢測）

- 底物：1.5 mL

- 終止試劑：20 mL

- 檢測緩沖液：5 mL

- 酶緩沖液：5 mL

儲存條件

試劑盒在室溫下運輸。收貨后將試劑盒組件儲存于-20°C。保質期：收貨后12個月。

注意事項

試劑僅供研究使用。使用試劑時應遵循實驗室試劑的常規注意事項。請參閱材料安全數據表以獲取詳細信息。

酶活性檢測操作步驟

該檢測基于酶催化的動力學反應。為確保相同的孵育時間，加入工作試劑的速度應快，混合應簡短但充分。建議使用多通道移液器。注意：試劑盒中未包含透明質酸酶或對照抑制劑。

試劑準備：檢測前，將所有組件平衡至室溫。工作試劑應新鮮配制，并在兩小時內使用。

酶準備：透明質酸酶應在酶緩沖液中配制，并新鮮使用。白蛋白和其他蛋白質會干擾此檢測，不應包含在酶緩沖液中。

以下協議針對人透明質酸酶（Acro Biosystems貨號PH0-H5225）或牛透明質酸酶（Calzyme貨號091A0300）進行了優化。如果使用不同物種或品牌的酶，我們建議您通過實驗確定每孔使用的最佳酶量（請參閱網站上的產品常見問題解答以獲取指導）。

將人透明質酸酶在酶緩沖液中稀釋至20 U/mL。如果使用牛透明質酸酶，則在酶緩沖液中稀釋至10 U/mL。

測試化合物準備：將測試化合物（即抑制劑）溶解在所選溶劑中。首先測試所選酶對溶劑的耐受性是明智的。在100 ?L酶促反應中，二甲基亞砜（DMSO）濃度為1%（體積比）或更低時不會干擾反應（20 ?L測試化合物可在5% DMSO中）。

所需材料（但未提供）

- 純化的人透明質酸酶（例如Acro Biosystems貨號PH0-H5225）或牛透明質酸酶（例如Calzyme貨號091A0300），以及如果需要的話，一種對照透明質酸酶抑制劑（例如6-O-棕櫚酰-L-抗壞血酸，TCI貨號A0540）、移液裝置、Eppendorf管、透明平底96孔板和板式讀數儀。

示例：

6-O-棕櫚酰-L-抗壞血酸滴定：重組人HAase與不同濃度的6-O-棕櫚酰-L-抗壞血酸一起孵育酸。每種濃度的抑制劑均含有5v%的DMSO（最終1v%100uL酶反應）。

文獻：

1. Lokeshwar, B., et al (2005). HYAL1 Hyaluronidase in Prostate Cancer:A Tumor Promoter and Suppressor. Cancer Res 65(17):7782-7789.

2. Girish, K., et al (2009). Hyaluronidase Inhibitors: A Biological and Therapeutic Perspective. Curr. Med. Chem. 16(18):2261-2288.

3. Whatcott, C., et al (2011). Targeting the Tumor Microenvironment in Cancer: Why Hyaluronidase Deserves a Second Look. Cancer Discovery. 1(4):291-96.

4. Whatcott, C., et al (2016). Hyaluronidase To Enhance NanoparticleBased Photodynamic Tumor Therapy. Nano Lett. 16(4):2512-2521.

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區的高新技術生物技術公司，專注于研發、生產和銷售高品質的生化檢測試劑盒，產品種類齊全，主要用于科學研究和生物醫藥開發，以滿足生命科學行業日益增長的需求。BioAssay Systems在現代藥物發現領域擁有超過50年的豐富經驗，已經開發了超過250種用于藥物發現和生命科學研究的檢測試劑盒。產品主要包括：1.血液尿液化學；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

作為BioAssay Systems在中國區域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產品。