BioAssay Systems 葡萄糖脫氫酶測定試劑盒- 生物樣本中GDH活性的測定

葡萄糖脫氫酶（GDH）屬于氧化還原酶家族，特別是那些作用于供體的CH-OH基團與其他受體的酶。GDH參與磷酸戊糖途徑。BioAssay Systems的非放射性、比色法GDH檢測基于在NADH偶聯的酶促反應中四氮唑鹽MTT的還原，生成的MTT還原形式在565 nm處有最大吸收峰。在565 nm處的吸光度增加與酶活性成正比。

作為BioAssay Systems在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產品葡萄糖脫氫酶測定試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點：

- 快速且靈敏。線性檢測范圍（20 uL樣本）：15分鐘反應時間為0.5 - 200 U/L。

- 方便且高通量。均相“混合-孵育-測量”型檢測?？稍诟咄亢Y選液體處理系統上輕松自動化，每天處理數千個樣本。

應用：

- 生物樣本（如血漿、血清、組織和培養基）中GDH活性的測定。

試劑盒組成（96孔板，100次檢測）：

- 檢測緩沖液：10 mL

- 二氫葉酸還原酶：120 uL

- NAD/MTT：1 mL

- 校準液：1.5 mL

- 底物：1 mL

儲存條件：  

試劑盒在常溫下運輸。收到后將所有組分儲存于-20°C。有效期：收到后6個月。

注意事項：  

試劑僅供研究使用。使用試劑時應遵循實驗室試劑的常規注意事項。請參考材料安全數據表以獲取詳細信息。

操作步驟：

該檢測基于動力學反應。為確保孵育時間一致，加入工作試劑到樣本中的操作應迅速，混合應簡短但充分。建議使用多通道移液器。可在任何所需溫度（例如25°C或37°C）下進行檢測。

樣本準備：

- 血清和血漿可以直接檢測。

- 組織：在解剖前，用磷酸鹽緩沖液（pH 7.4）沖洗組織以去除血液。將組織（50 mg）在含有50 mM磷酸鉀（pH 7.5）的緩沖液中勻漿。在4°C下以10,000 × g離心15分鐘。取上清液用于檢測。

- 細胞裂解液：通過在4°C下以2,000 × g離心5分鐘收集細胞。對于貼壁細胞，不要使用蛋白酶酶收獲細胞，而是使用橡膠刮刀。在含有50 mM磷酸鉀（pH 7.5）的冷緩沖液中適當體積內勻漿或超聲細胞。在4°C下以10,000 × g離心15分鐘。取上清液用于檢測。

- 所有樣本可以在-20至-80°C下儲存至少一個月。

試劑準備：  

將試劑平衡至所需的反應溫度（例如25°C或37°C）。使用前短暫離心試管。通過混合以下試劑為每個96孔檢測準備足夠的工作試劑（WR）：8 uL底物，8 uL NAD/MTT溶液，1 uL二氫葉酸還原酶和70 uL檢測緩沖液。

反應準備：

1. 將100 uL H?O（ODH?O）和100 uL校準液（ODCAL）溶液分別加入透明平底96孔板的孔中。

2. 將每個樣本的20 uL分別加入單獨的孔中，然后向每個樣本孔中加入80 uL工作試劑（WR）。輕拍板子以混合。

3. 在酶標儀上讀取565 nm的吸光度（OD?），15分鐘后再次讀取（OD??）。

所需材料（但未提供）：  

移液裝置及配件（例如多通道移液器）、透明平底96孔板（例如VWR貨號82050-760）、離心管和酶標儀。

示例：

文獻：

1. Bak, TG (1967) "Studies on glucose dehydrogenase of Aspergillus oryzae. II Purification and physical and chemical properties". Biochim. Biophys. Acta. 139: 277–93.

2. Brink, NG, et al. (1953) "Beef liver glucose dehydrogenase. 1.Purification and properties". Acta Chem. Scand. 7: 1081–1089.

3. Thompson RE, Carper WR (1970) "Glucose dehydrogenase from pig liver. I. Isolation and purification". Biochim. Biophys. Acta 198 (3):397–406.

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區的高新技術生物技術公司，專注于研發、生產和銷售高品質的生化檢測試劑盒，產品種類齊全，主要用于科學研究和生物醫藥開發，以滿足生命科學行業日益增長的需求。BioAssay Systems在現代藥物發現領域擁有超過50年的豐富經驗，已經開發了超過250種用于藥物發現和生命科學研究的檢測試劑盒。產品主要包括：1.血液尿液化學；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

作為BioAssay Systems在中國區域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產品。