BioAssay Systems 膽固醇攝取測定試劑盒,基于細胞對熒光標記膽固醇探針的攝取

膽固醇是一種固醇類脂質，存在于細胞膜中，并在所有動物的血液中運輸。它用于形成細胞膜和激素，并在細胞信號傳導過程中發揮重要作用。細胞對膽固醇水平的調節是一個復雜的系統，其中的異常情況與肥胖和心臟病有關。膽固醇攝取的增加也與高度增殖的癌細胞有關。通過監測細胞對膽固醇的攝取，可以探索這些日益嚴重的健康問題，并篩選可能的藥物治療方法。

BioAssay Systems的膽固醇攝取檢測試劑盒基于細胞對熒光標記膽固醇探針的攝取。在λex/em = 485/535 nm處測量的熒光強度與細胞攝取的膽固醇量成正比。

作為BioAssay Systems在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產品膽固醇攝取測定試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點：

- 方便：直接在96孔熒光板中處理細胞。

- 安全：非放射性檢測。

- 高通量：可作為高通量96孔板檢測方法，每天可處理數千個樣本。

應用：

- 直接檢測：貼壁細胞的膽固醇攝取、膽固醇攝取抑制劑的篩選以及藥物對膽固醇攝取的影響評估。

試劑盒組成（96孔板，100次檢測）：

- 檢測試劑：12 mL

- 熒光示蹤劑：250 uL

- 陽性對照（2.5 mM）：20 uL

儲存條件：

試劑盒在室溫下運輸。收到后將所有組分儲存于-20°C。有效期：收到后6個月。

注意事項：

試劑僅供研究使用。使用試劑時應遵循實驗室試劑的常規注意事項。請參考材料安全數據表以獲取詳細信息。

試劑準備：

在檢測前將所有組分平衡至室溫。打開前短暫離心試管。

操作步驟：

示蹤劑培養基的制備：

通過將熒光示蹤劑稀釋1:50于無血清培養基或低百分比胎牛血清（FBS）培養基（<1%）中制備示蹤劑培養基。您將使用示蹤劑培養基來制備處理組、對照組和陽性對照組的培養基。

使用96孔板的檢測步驟：

1. 使用黑色、平底、熒光96孔板進行檢測。  

- 對于對照孔，將細胞以期望的密度接種于100 uL示蹤劑培養基中。  

- 對于陽性對照，在單獨的試管中將2.5 mM陽性對照稀釋1:1000于示蹤劑培養基中，最終濃度為2.5 uM。將細胞以期望的密度接種于100 uL含有陽性對照的示蹤劑培養基中。注意：您可能需要測試不同濃度的陽性對照，以確定對所用細胞系最有效的濃度。  

- 對于每個處理組，在單獨的試管中將處理物或化合物以期望的濃度加入示蹤劑培養基中。將細胞以期望的密度接種于100 uL含有處理物的示蹤劑培養基中。  

- 注意：我們建議所有實驗變量至少進行雙份檢測，如果不是三份或更多的話。

2. 讓細胞生長24至72小時，或達到期望的融合度。

3. 小心吸去所有孔中的培養基。

4. 用100 uL 1×PBS沖洗所有孔兩次。確保沖洗后完全去除PBS。

5. 在所有孔中加入100 uL檢測試劑。

6. 立即在λex/em = 485/535 nm處讀取熒光強度。

所需材料（但未提供）：

移液裝置、培養基、PBS、黑色平底96孔板以及能夠讀取λex/em = 485/535 nm的熒光板讀取器。

細胞密度與膽固醇攝取：

PANC1細胞在含有1% FBS的DMEM培養基中以不同細胞密度接種，并加入熒光示蹤劑。在檢測前培養48小時。

陽性對照：

MDA-MB-231細胞在無血清培養基中用不同濃度的陽性對照處理，并加入熒光示蹤劑。在檢測前培養72小時。

示例：

- 左圖：細胞密度與膽固醇攝取：PANC1細胞在含有1%胎牛血清（FBS）的DMEM培養基中以不同細胞密度接種，并加入熒光示蹤劑。在檢測前培養48小時。

- 右圖：陽性對照：MDA-MB-231細胞在無血清培養基中用不同濃度的陽性對照處理，并加入熒光示蹤劑。在檢測前培養72小時。

文學：

1. Beloribi-Djefaflia, S., et al (2016). Lipid metabolic reprogramming in cancer cells. Oncogenesis 5, e189.

2. Martin, B., van Golen, K. (2012). A Comparison of Cholesterol Uptake and Storage in Inflammatory and Noninflammatory Breast Cancer Cells. Int J Breast Cancer 2012, Article ID 412581.

3. Feng, D., et al (2010). Curcumin inhibits cholesterol uptake in Caco-2 cells by down-regulation of NPC1L1. Lipids Health Dis 9: 40.

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區的高新技術生物技術公司，專注于研發、生產和銷售高品質的生化檢測試劑盒，產品種類齊全，主要用于科學研究和生物醫藥開發，以滿足生命科學行業日益增長的需求。BioAssay Systems在現代藥物發現領域擁有超過50年的豐富經驗，已經開發了超過250種用于藥物發現和生命科學研究的檢測試劑盒。產品主要包括：1.血液尿液化學；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

作為BioAssay Systems在中國區域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產品。