BioAssay Systems 乙酰膽堿酯酶試劑盒-靈敏且準確，檢測范圍為10到600 U/L

乙酰膽堿酯酶（EC 3.1.1.7，AChE），也稱為紅細胞膽堿酯酶，主要存在于血液和神經突觸中。血清膽堿酯酶活性降低可能與接觸殺蟲劑或某些變異基因型有關。AChE催化神經遞質乙酰膽堿水解為膽堿和乙酸，這一反應對于膽堿能神經元在激活后恢復到靜息狀態是必需的。細胞和血漿中的膽堿酯酶水平被用作評估與有機磷殺蟲劑接觸和暴露的安全預防措施的依據，以及確定工人是否需要從接觸這些殺蟲劑的區域撤離的依據。

簡單、直接且適合自動化的檢測乙酰膽堿酯酶（AChE）活性的程序是非常理想的。BioAssay Systems的QuantiChrom?乙酰膽堿酯酶檢測試劑盒基于改進的Ellman方法，其中乙酰膽堿酯酶作用產生的硫醇膽堿與5,5'-二硫代雙（2-硝基苯甲酸）形成黃色物質。在412 nm處測量的產物顏色強度與樣本中的酶活性成正比。

作為BioAssay Systems在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產品乙酰膽堿酯酶試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

應用：直接檢測血液、血清、血漿和其他生物樣本中的乙酰膽堿酯酶活性。評估乙酰膽堿酯酶抑制劑。

儲存條件：試劑盒在室溫下運輸。收到后將所有試劑儲存于室溫。保質期：收到后6個月。

注意事項：試劑僅供研究使用。使用試劑時應遵循實驗室試劑的常規注意事項。請參考材料安全數據表以獲取詳細信息。

實驗步驟：

樣本準備：

- 血液樣本應在檢測緩沖液中稀釋40倍，例如準確移取5 ?L血液并充分混合于195 ?L檢測緩沖液中。

- 組織或細胞裂解液通過在0.1M磷酸鹽緩沖液（pH 7.5）中短暫超聲或勻漿制備，隨后以14,000 rpm離心5分鐘。使用上清液進行檢測。

- 最好使用新鮮樣本進行檢測。如果無法做到，應將樣本冷藏，并在24小時內完成檢測。

試劑準備：工作試劑應現配現用，并在30分鐘內使用。每個反應孔需要2 mg試劑。根據所需量稱取相應重量（mg）的試劑于離心管中。每2 mg試劑加入200 ?L檢測緩沖液。渦旋溶解。

實驗操作：

1. 校準液：將200 ?L水和200 ?L校準液分別加入透明底部96孔板的孔中。

- 樣本：在單獨的孔中每孔加入10 ?L樣本。

2. 反應：將190 ?L新制備的工作試劑加入所有樣本孔中，輕輕敲擊平板以混合均勻。

- 在平板讀數器上分別于2分鐘和10分鐘讀取412 nm的吸光度。

3. 計算：乙酰膽堿酯酶活性按以下公式計算：

其中OD10和OD2是樣品在10℃下的OD412nm值分別為1分鐘和2分鐘。ODCAL和ODH2O是OD412nm10分鐘時校準器和水的值。n是稀釋系數（全血n=40）。數字“200”是等價的校準品在測定條件下的活性。

注意：如果未考慮稀釋倍數的AChE活性高于600 U/L，需用檢測緩沖液進一步稀釋樣本并重復檢測。將結果乘以稀釋倍數。

單位定義：在檢測條件下（pH 7.5和室溫），每分鐘催化產生1 ?mol硫醇膽堿的酶量為1個單位。

主要特點：

- 靈敏且準確。96孔板檢測中乙酰膽堿酯酶活性的檢測范圍為10到600 U/L。

- 便捷。操作流程包括加入單一工作試劑，并在室溫下分別于2分鐘和10分鐘讀取吸光度。

- 高通量?？梢暂p松作為高通量96孔板檢測，每天檢測數千個樣本。

試劑盒內容（96孔板100次測試）：

- 檢測緩沖液（pH 7.5）：30 mL

- 試劑：240 mg

- 校準液：4 mL（相當于200 U/L）

示例：

使用96孔板協議對兩份人血樣本進行雙份檢測。AChE活性分別為3,402 ± 163和3,660 ± 151 U/L。

在96孔板中0-1000 U/L乙酰膽堿酯酶反應的動力學。

0-1000U/L乙酰膽堿酯酶在96孔板中的反應動力學

文獻參考：

1. Ketenci, S. et al (2020). The neurochemical effects of prazosin treatment on fear circuitry in a rat traumatic stress model. Clinical Psychopharmacology and Neuroscience, 18(2), 219-230.

2. Hafiz, Z. Z., et al (2020). Inhibitory effects of raw-extract centella asiatica (Reca) on acetylcholinesterase, inflammations, and oxidative stress activities via in vitro and in vivo. Molecules (Basel,Switzerland), 25(4).

3. Voorhees, J. R., et al (2019). Occupational-like organophosphate exposure disrupts microglia and accelerates deficits in a rat model of Alzheimer 's disease. NPJ Aging and Mechanisms of Disease,5, 3. 

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區的高新技術生物技術公司，專注于研發、生產和銷售高品質的生化檢測試劑盒，產品種類齊全，主要用于科學研究和生物醫藥開發，以滿足生命科學行業日益增長的需求。BioAssay Systems在現代藥物發現領域擁有超過50年的豐富經驗，已經開發了超過250種用于藥物發現和生命科學研究的檢測試劑盒。產品主要包括：1.血液尿液化學；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

作為BioAssay Systems在中國區域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產品。