如何進行補體系統研究-- 來自Hycult Biotech的專業指南

在Hycult Biotech，我們深知準確分析補體（complement）系統的重要性。這不僅需要使用正確的技術，還需要在樣本處理上遵循正確的預分析程序，以避免錯誤的結果。我們的資深科學家Erik Toonen，專注于補體研究，以及由Ricardo Brandwijk領導的專業團隊，也專注于補體研究，他們在Pubmed/MEDLINE數據庫上進行了廣泛的文獻搜索。他們的重點是研究在2017年2月至2022年2月期間發表的、測量人類血樣中關鍵補體成分的研究。他們審查了這些研究是否使用了正確的樣本類型和技術來進行補體分析。以下是他們的發現。

桌面分析

在376項研究中，共有92項被選為全文分析。其中45項（49%）被認定為使用了正確的樣本類型和技術進行補體分析，而25項（27%）沒有使用正確的樣本類型或技術。對于22項研究（24%），沒有指明使用了哪種樣本類型。

在審查的研究中，相當一部分沒有使用適當的樣本類型來評估補體激活，或者沒有提及使用了哪種樣本類型。這種偏離標準化程序的做法可能導致對補體生物標志物水平的誤解，并妨礙了不同研究之間補體測量結果的適當比較。因此，本研究強調了制定準確和推薦程序的一般指南的必要性。

適當的樣本類型

選擇正確的樣本類型至關重要，首先要區分你是在評估補體系統的總體功能還是特定成分。當你的重點是評估補體功能時，使用補體保存血清至關重要。相反，當你打算評估個別補體成分時，應使用EDTA-血漿。下面的流程圖幫助你確定合適的樣本類型，并指導你選擇最合適的樣本預處理方法。

適當的技術

如果你想確定哪種技術或檢測最適合你的研究，同樣重要的是要確定你是在進行補體功能的評估還是個別補體成分的評估。在評估補體功能時，最合適的技術包括溶血活性測定、功能性ELISA或功能化脂質體。對于評估個別補體成分，首選的方法是免疫比濁法、ELISA、多重檢測、組學/蛋白質芯片或質譜分析。

你可以在下面找到可選指南，或者直接聯系我們以獲得幫助。

參考：

Brandwijk RJMGE, Michels MAHM, van Rossum M, de Nooijer AH, Nilsson PH, de Bruin WCC, Toonen EJM. Pitfalls in complement analysis: A systematic literature review of assessing complement activation. Front Immunol. 2022 Oct 18;13:1007102. doi: 10.3389/fimmu.2022.1007102. PMID: 36330514; PMCID: PMC9623276.

補體研究流程圖，

幫助你選擇： (A) 適當的樣本類型 (B) 評估補體的適當技術。

補體途徑

補體系統是免疫系統的關鍵部分，由30多種蛋白質組成，共同幫助識別和摧毀外來病原體。補體激活有三個主要途徑：經典途徑、凝集素途徑和替代途徑。

1、經典途徑，在抗體結合到病原體表面的特定抗原時被激活。這種結合觸發了一系列補體蛋白的結合和激活，最終導致形成膜攻擊復合體（MAC），刺破并摧毀病原體的細胞膜。

2、凝集素途，徑在稱為凝集素的蛋白質結合到病原體表面的某些糖時被激活。這種結合觸發了一系列類似的補體蛋白激活，導致形成MAC并摧毀病原體。

3、替代途徑，始終在低水平上活躍，并且可以通過病原體表面或受損宿主細胞上的某些分子的存在而被觸發。這條途徑也導致形成MAC并摧毀病原體。

所有三個補體途徑共同工作，為抵御入侵病原體提供快速有效的防御。它們還在調節免疫反應和清除受損宿主細胞中發揮作用。補體系統的功能障礙可能導致各種疾病，包括自身免疫性疾病和感染。

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