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特色產品細胞周期直接負責細胞增殖,是各種療法的主要靶標。因此,細胞周期分析是研究細胞如何增殖以及其調控下的治療機制的重要工具。經典的細胞周期檢測需要先將細胞用乙醇固定,用RNase處理,最后用DAPI或碘化丙啶染色并進行分析。根據使用的細胞系和實驗者的需求,這些額外的步驟可能需要從幾個小時到整整一天的時間。然而,細胞周期檢測試劑盒(紅色)(產品編號C3851)使用一種特殊的表面活性劑來滲透細胞膜,僅足以讓一種DNA特異性熒光染料(7-AAD,激發波長Z大值=549nm,發射波長Z大值=648nm)進入,而不會讓DNA離開細胞。通過這種方式,可以在不進行預固定的情況下進行細胞周期分析。只需收集你感興趣的細胞,與試劑盒中包含的緩沖液/染料一起孵化Z少15分鐘,然后進行測量。
細胞周期測定試劑盒(紅色)#C3851組成:
7-AAD for 100 assays
Cell staining buffer for 100 assays
艾美捷東京化成(TCI)細胞周期測定試劑盒(紅色)應用:
觀察HeLa細胞的細胞周期
將試劑盒中包含的7-AAD溶解在100微升的DMSO中(未包含)。
將步驟1中的1微升7-AAD溶液與包含的200微升細胞染色緩沖液混合。
用胰蛋白酶處理HeLa細胞,并用PBS洗滌一次。
在試管中收集5.0x10^4個細胞。離心后吸取上清液,加入步驟2中的溶液,并孵化15分鐘。
在流式細胞儀上進行細胞周期分析(?)。
(? 激光波長=488納米,濾光片波長/帶寬=700納米/54納米)

圖使用所示方法對來自相同群體的HeLa細胞進行染色,并在流式細胞儀上進行分析。
(a)細胞用C3851染色。(b)使用傳統的乙醇固定和PI/RNase方法對細胞進行染色。
這兩種方法都能夠清晰地分辨G0/G1、S和G2/M峰。
東京化成(TCI)細胞周期測定試劑盒(紅色)文獻參考:
New use for an old reagent: Cell cycle analysis of DNA content using flow cytometry in formamide treated cells
M. Carbonari, Cytom. A 2016, 89, 498.
作為TCI(東京化成)在中國的區域特約合作伙伴,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的TCI的產品及服務。

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