快速內切酶EagI，快速精確完成DNA切割

快速內切酶是一系列經過基因工程重組、能夠在 5~15 分鐘內精確完成 DNA 切割的限制性內切酶，適用于質粒DNA、PCR 產物或基因組 DNA 等的快速酶切?？焖賰惹忻妇哂腥缦绿攸c：5~15 分鐘內即可完成酶切；共用一種酶切 Buffer，大大簡化酶切反應體系；良好的酶活冗余度，輕松應對底物過量或困難模板酶切。

艾美捷快速內切酶EagI：

Cat #: C-BSM535

Size: 25 rxns

Storage: -20°C

在推薦的反應條件下，快速內切酶EagI可在5~15分鐘內消化單位底物。酶的極適反應溫度為37°C。

當底物DNA被CpG甲基化酶甲基化時，這種限制性酶的切割可能被阻斷或受損。

該酶可以在80°C下孵育20分鐘進行熱滅活。孵育3小時不會顯示星形活性，但孵育時間較長可能會導致星形活性。

使用方法：

1。快速DNA消化方案

①將下列反應組分按所示順序在冰上混合：

a. 對于純化的PCR產物。如果PCR產物未純化，則應將10倍CutOne“”緩沖液的量減少到2μl，以減少未純化PCR產物中的剩余金屬離子。如果用于克隆，我們建議在消化前純化PCR產物，因為一些DNA聚合酶的核酸外切酶活性可能會改變切割DNA的末端。②輕輕攪拌并向下旋轉；③在37°C下培養15分鐘（質粒DNA）或15～30分鐘（PCR產物）或30～60分鐘（基因組DNA）；

④ 可選：在80℃下加熱20分鐘使酶失活；

⑤ 如果在反應中使用CutOne“”顏色緩沖液，則將反應混合物的等分試樣直接加載在凝膠上。

2.DNA的雙重和多重消化

① 使用每種酶1μl，并適當擴大反應條件；

② 反應混合物中酶的總體積不應超過總反應體積的1/10；③如果酶需要不同的反應溫度，從需要較低溫度的酶開始，然后加入第二種酶并在較高溫度下孵育。

3.擴大質粒DNA消化反應

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