人T 細胞激活磁珠，CD3/CD28單抗偶聯磁珠：實現更高效的活化

Human T-Activator CD3/CD28 Beads旨在用于人類T細胞的分離和體外擴增。它可應用于CAR-T和其他T細胞培養技術的應用。Human T-Activator CD3/CD28 Beads由直徑為4.5 μm的磁性珠子與抗人CD3和抗人CD28抗體結合而成，為人類T細胞的分離和擴增提供了簡單的方法。

首先，人T 細胞激活磁珠，CD3/CD28單抗偶聯磁珠能夠輕松將CD3+ T細胞從外周血單個核細胞(PBMCs)中分離和濃縮。在分離后，磁性珠子上的抗CD3和抗CD28抗體的共價結合提供了調節T細胞活化和擴增所需的初級和共刺激信號。

在細胞擴增過程中，細胞培養需要額外添加其他細胞因子，如人源IL-2、IL-7和IL-15，以實現更高效的活化。在10-13天的培養期內，激活的細胞可以擴增1000倍。

艾美捷人T 細胞激活磁珠，CD3/CD28單抗偶聯磁珠:

貨號：C-BETA2001

規格：1mL/10mL

儲存：2°C至8°C，請勿冷凍

操作步驟：洗滌Human T-Activator CD3/CD28 Beads

1. 將Human T-Activator CD3/CD28 Beads（珠子）重新懸浮于管中（振蕩30秒以上，或者傾斜旋轉5分鐘）。

2. 將珠子轉移到容器中，加入所需體積。

3. 加入相同體積的PBS（含1% HSA）。如果珠子體積小于1mL，加入1mL含1% HSA的PBS進行懸浮。

4. 將管子放在磁架上1分鐘，然后棄掉上清液。

5. 將管子從磁架上取下，使用相同體積的含1% HSA的PBS重新懸浮珠子。

分離CD3+ T細胞

1. 對于Ficoll分離的PBMCs，輕輕將細胞懸浮于含1% HSA的PBS中，并將細胞密度調整為2-5 × 107 cells/mL。注意細胞總數不應超過2 × 108 cells/mL。注意：在開始之前，通過流式細胞術確定樣品中CD3+ T細胞的百分比。

2. 將洗滌后的珠子以3（珠子）：1（CD3+ T細胞）的比例加入PBMCs中，如果細胞是純分離的T細胞，則將珠子與細胞的比例調整為1：1。

3. 以50~120 rpm/min的速度旋轉樣品，并在室溫下孵育30分鐘。

4. 用T細胞培養基或含1% HSA的PBS稀釋珠子和細胞混合物，以確保磁選分離的體積。然后將管子放在磁架上1~2分鐘。

5. 去除上清液，然后用含300IU/mL IL-2的T細胞培養基重新懸浮珠子和細胞混合物，并將細胞密度調整為0.5 × 106 cells/mL~1 × 106 cells/mL。

6. 將細胞懸液放入37°C、5% CO2的培養箱中孵育。

T細胞的活化和擴增:

1. 從培養的第3天開始，每天計算T細胞的數量。

2. 在細胞擴增的后期，定期輕輕吹動培養中的細胞懸液，以分離珠子和細胞。

3. 當CD3+ T細胞數量超過1 × 106 cells/mL時，加入含IL-2的T細胞培養基稀釋細胞，并將細胞密度調整到約0.5 × 105 cells/mL左右。

4. 在培養結束時（第9-14天），計數細胞并用磁架去除珠子。

人T 細胞激活磁珠，CD3/CD28單抗偶聯磁珠數據參考：

圖1：磁選分離CD3+ T細胞。PBMCs與Human T-Activator CD3/CD28 Beads（目錄號C-BETA2001）以3個珠子與每個細胞的比例孵育30分鐘，通過流式細胞術分析陽性（分離）細胞的分離效率。

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