BPS Bioscience GIPR/CRE 熒光素酶報告基因 HEK293 細胞系：功能性驗證與應用

GIPR/CRE Luciferase Reporter HEK293 Cell Line 是一種經過工程改造的 HEK293 細胞系，表達由 cAMP 反應元件（CRE）控制的螢火蟲熒光素酶，以及人類 GIPR（胃抑制多肽受體；NM_000164.4）?？梢酝ㄟ^測量熒光素酶活性來監測這些細胞中 GIPR 的激活。GIPR/CRE Luciferase Reporter HEK293 Cell Line 的功能性已在使用胃抑制多肽（GIP）、Tirzepatide 和 Retatrutide 等激動劑的劑量反應實驗中得到驗證。這些激動劑以劑量依賴性方式誘導熒光素酶活性，如圖 1 所示。

圖 1. GIPR/CRE Luciferase Reporter HEK293 Cell Line 中作用機制的示意圖。

背景

胃抑制多肽受體（GIPR），也稱為葡萄糖依賴性胰島素促進多肽受體，屬于 B1 類 G 蛋白偶聯受體（GPCR）家族。GIPR 主要存在于胰腺的 β-細胞中，作為胃抑制多肽（GIP）激素的受體。作為腸促胰島素激素之一，GIP 通過刺激胰腺 β-細胞釋放胰島素來調節葡萄糖代謝。由于 GIPR/GLP-1R 異源二聚體化調節 GLP-1R 信號傳導，同時結合 GIPR 和 GLP-1R 的雙重激動劑已顯示出治療 II 型糖尿?。═2DM）和肥胖癥的臨床療效。

作為BPS Bioscience在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦BPS Bioscience熱銷產品GIPR/CRE 熒光素酶報告基因 HEK293 細胞系。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

應用（用途）

在細胞模型中篩選和表征人類 GIPR 的激動劑。

細胞解凍

1. 在 37°C 水浴中搖晃裝有冷凍細胞的小瓶大約 60 秒。細胞一旦解凍（可能比 60 秒稍快或稍慢），迅速將小瓶的全部內容轉移到含有 10 ml 預溫的解凍培養基 1 的試管中。

注意：在 37°C 的水浴中放置細胞過久會導致活性迅速喪失。

2. 立即以 300 x g 的速度離心細胞 5 分鐘，去除培養基并用 5 ml 預溫的解凍培養基 1 重懸細胞。

3. 將重懸的細胞轉移到 T25 培養瓶中，并在 37°C 和 5% CO2 培養箱中培養。

4. 培養 24 小時后，檢查細胞附著和活性。更換培養基為新鮮的解凍培養基 1，并繼續在 37°C 和 5% CO2 培養箱中培養，直到細胞準備好分裂。

5. 細胞應在完全融合前進行傳代。在第一次傳代和后續傳代中，使用生長培養基 1G。

細胞傳代

1. 抽吸培養基，用無 Ca2+/Mg2+ 的磷酸鹽緩沖液（PBS）沖洗細胞，并用 0.05% 胰酶/EDTA 從培養容器中分離細胞。

2. 一旦細胞分離，加入生長培養基 1G 并轉移到試管中。

3. 以 300 x g 的速度離心細胞 5 分鐘，去除培養基并用生長培養基 1G 重懸細胞。

4. 按照推薦的 1:6 至 1:8 的傳代比例，每周或每兩周將細胞種植到新的培養容器中。

細胞冷凍

1. 抽吸培養基，用無 Ca2+/Mg2+ 的 PBS 沖洗細胞，并用 0.05% 胰酶/EDTA 從培養容器中分離細胞。

2. 一旦細胞分離，加入生長培養基 1G 并計數細胞。

3. 以 300 x g 的速度離心細胞 5 分鐘，去除培養基并在 4°C 的細胞冷凍培養基（BPS Bioscience #79796）中重懸細胞，細胞濃度約為 2 x 10^6 個細胞/ml。

4. 將 1 ml 的細胞懸浮液分裝到每個冷凍小瓶中。將小瓶放入保溫容器中緩慢冷卻，并在 -80°C 下過夜保存。

5. 次日將小瓶轉移到液氮中長期保存。

注意：建議在早期傳代時擴增細胞并至少冷凍 10 個小瓶以備將來使用。

圖 . GIPR/CRE Luciferase Reporter HEK293 Cell Line 中 GIPR 的細胞表面表達。

GIPR/CRE Luciferase Reporter HEK293 細胞（綠色）或對照 CRE Luciferase Reporter HEK293 細胞（藍色）用人類 GIPR PE 偶聯抗體（R&D Systems #FAB8210P）染色，并通過流式細胞儀分析。Y 軸代表細胞數量百分比。X 軸表示 PE 的強度。

BPS Bioscience是一家通過ISO 9001:2015認證的生命科學領域的供應商，公司一直致力于開發藥物研發領域的重組蛋白酶、蛋白酶活性/抑制劑篩選試劑盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年創立，從創立至今一直致力于提供藥物研發領域的創新解決方案，以推動新的藥物發現。公司主要關注的領域包括免疫療法、表觀遺傳學、新型冠狀病毒、CRISPR、細胞信號轉導等，主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、組蛋白去甲基化酶、組蛋白甲基化轉移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 

作為BPS Bioscience在中國的區域代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BPS Bioscience以及客戶訂制化服務。