BPS Bioscience FcRL5 HEK293 細胞系：多發性骨髓瘤治療研究的創新模型

重組HEK293細胞穩定表達全長人類FcRL5（Fc受體樣5，也稱為CD307，參考序列NM_031281）。

背景

FcRL5是一種單次跨膜的類型1膜蛋白，包含8個免疫球蛋白樣C2型結構域。FcRL5可能參與B細胞發育和淋巴瘤發生。此外，它在被診斷為多發性骨髓瘤患者的惡性漿細胞中富集，是抗體藥物偶聯物（ADC）和抗FcRL5 CAR T細胞的有吸引力的靶標。

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應用

用作抗FcRL5 CAR T細胞、抗FcRL5 ADC和雙特異性抗體的靶細胞。

細胞培養協議

細胞解凍

1. 在37°C水浴中搖晃裝有冷凍細胞的小瓶大約60秒。細胞一旦解凍（可能比60秒稍快或稍慢），迅速將小瓶的全部內容轉移到含有10毫升預溫的解凍培養基1（不含普魯霉素）的試管中。如果將細胞在37°C水浴中放置過久，將導致活性迅速喪失。

2. 立即以300 x g的速度離心細胞5分鐘，去除培養基并用5毫升預溫的解凍培養基1（不含普魯霉素）重懸細胞。

3. 將重懸的細胞轉移到T25或T75培養瓶中，并在37°C和5% CO2培養箱中培養。

4. 培養24小時后，檢查細胞附著和活性。更換培養基為新鮮的解凍培養基1（不含普魯霉素），并在37°C和5% CO2培養箱中繼續培養，直到細胞準備好傳代。

5. 細胞應在完全融合前進行傳代。在第一次傳代和后續傳代中，使用生長培養基1T（含普魯霉素）。

細胞傳代

1. 抽吸培養基，用磷酸鹽緩沖液（PBS）沖洗細胞，并用0.05%胰酶/EDTA從培養容器中分離細胞。

2. 一旦細胞分離，加入生長培養基1T并轉移到試管中。以300 x g的速度離心細胞5分鐘，去除培養基并用含普魯霉素的生長培養基1T重懸細胞。每三天按照1:10的期望傳代比例將細胞種植到新的培養容器中。

細胞冷凍

1. 抽吸培養基，用磷酸鹽緩沖液（PBS）沖洗細胞，并用0.05%胰酶/EDTA從培養容器中分離細胞。

2. 一旦細胞分離，加入生長培養基1T并計數細胞。

3. 以300 x g的速度離心細胞5分鐘，去除培養基并在4°C冷凍培養基（BPS Bioscience #79796，或10% DMSO + 90% FBS）中重懸細胞，細胞濃度約為2 x 10^6個細胞/毫升。

4. 將1毫升的細胞懸浮液分裝到冷凍小瓶中。將小瓶放入保溫容器中緩慢冷卻，并在-80°C下過夜保存。

5. 次日將小瓶轉移到液氮中保存。

注意：建議在早期傳代時擴增細胞并至少冷凍10個小瓶以備將來使用。

圖1. FcRL5 HEK293細胞中FcRL5表達的分析。35,000個FcRL5 HEK293細胞和HEK293親本細胞用PE偶聯的抗人FcRL5抗體（BioLegend，#340304）染色，并通過流式細胞儀分析。HEK293親本細胞以綠色顯示，FcRL5 HEK293細胞以藍色顯示。

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Products Catalog # Size

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BPS Bioscience是一家通過ISO 9001:2015認證的生命科學領域的供應商，公司一直致力于開發藥物研發領域的重組蛋白酶、蛋白酶活性/抑制劑篩選試劑盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年創立，從創立至今一直致力于提供藥物研發領域的創新解決方案，以推動新的藥物發現。公司主要關注的領域包括免疫療法、表觀遺傳學、新型冠狀病毒、CRISPR、細胞信號轉導等，主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、組蛋白去甲基化酶、組蛋白甲基化轉移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 

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