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特色產品PCSK9-LDLR TR-FRET實驗試劑盒旨在以均相384孔反應格式測量對PCSK9與LDLR結合的抑制作用。PCSK9已知通過與LDLR胞外結構域結合,作為肝臟低密度脂蛋白受體(LDLRs)的負調節因子發揮作用?;贔RET的實驗無需繁瑣的洗滌步驟,使其特別適用于高通量篩選應用。實驗操作流程簡單直接:將含有Eu(銪)標記的LDLR胞外結構域、染料標記的受體、生物素標記的PCSK9以及抑制劑的樣品孵育兩小時。隨后,使用熒光讀數儀測量熒光強度。
艾美捷PCSK9-LDLR TR-FRET檢測試劑盒:
貨號:BPQ-72010
別名:pcsk9、膽固醇、LDL、kexin
實驗試劑盒形式:TR-FRET(時間分辨熒光共振能量轉移)
物種:人
提供形式:試劑盒采用便捷的格式,包含生物素標記的PCSK9、Eu(銪)標記的LDLR、染料標記的受體、實驗緩沖液和微孔板,可進行384次反應。
所需材料(但未提供):
能夠測量時間分辨熒光共振能量轉移(TR-FRET)的熒光微孔板讀數儀
可調節微量移液器及無菌吸頭
儲存/穩定性:按照說明儲存時,該試劑盒自收到之日起有效期至少為6個月。
應用:適用于篩選小分子抑制劑,用于藥物發現和高通量篩選(HTS)應用。
運輸溫度:-80°C
注意事項:避免反復凍融。
結果計算:
應進行兩次連續測量。首先測量Tb(鋱)供體的發射光(620 nm),隨后測量染料受體的發射光(665 nm)。數據分析通過計算TR-FRET比值(665 nm發射光/620 nm發射光)進行。
如果需要,數據可以歸一化為抑制百分比。通常在抑制劑篩選中,將陽性對照的FRET值設為0%抑制,陰性對照的FRET值設為100%抑制。
實驗結果示例:

圖:PCSK9與LDLR的相互作用。
文獻參考:
1. Chan, J.C. et al. (2009). Proc. Natl Acad. Sci. USA, 106, 9820-9825.
2. Liang, H., et al. (2012) J. Pharmacol. Exp. Ther. 340 2289-236.

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