Cardiolipin瓊脂糖珠--提高實驗效率，減少樣本損失

Cardiolipin（心磷脂）是一種主要存在于線粒體內膜的重要磷脂，對于維持線粒體功能至關重要。在生物化學研究中，Cardiolipin瓊脂糖珠作為一種分析工具，具有特定的應用。

Cardiolipin瓊脂糖珠是由心磷脂與瓊脂糖基質結合形成的珠狀顆粒，通常用于生物化學和分子生物學實驗中。這些珠?？梢宰鳛楣滔嘀С治?，用于親和層析、酶聯免疫吸附測定（ELISA）等多種分析技術。

艾美捷Cardiolipin瓊脂糖珠（BGT-OPU-101）裂解緩沖液：

鹽（10-20 mM HEPES，pH 7.4，100-150 mM NaCl）

非離子洗滌劑*（如0.1–2%Igepal）

二價陽離子（0-10 mM EDTA和/或EGTA）

蛋白酶抑制劑（完整的迷你蛋白酶片、原釩酸鈉、氟化鈉）

脂質珠?檢測說明：

1. 脂質包被珠有1 mL和0.1 mL兩種規格，以50%的漿液形式在1X PBS緩沖液中提供。

2. 訂購1 mL脂質珠，附帶200 ?L的對照珠。

3. 儲存于2-8°C。產品對溫度和光線敏感，請勿冷凍。

4. 以1,000 x g或更低速度離心珠。不要高速離心珠，因為這可能會壓碎珠。

5. 每1 mL珠中總共有10納摩爾的結合脂質。

6. 珠的直徑范圍在45至165微米之間。

7. 每個蛋白使用50-100 ?L的50%漿液脂質包被珠和對照珠。

脂質珠? - 蛋白拉下協議：

1. 充分混合珠（不要渦旋）。將50-100 ?L的50%珠漿液轉移到0.5-1.5 mL的管中。

2. 以1,000 x g或更低速度離心珠以沉淀。小心移除上清液，避免丟失珠。

3. 用洗滌緩沖液的10倍過量洗滌珠。輕輕混合，孵育1-2分鐘。重復洗滌步驟兩次。

4. 小心移除洗滌上清液，并將珠在含有您的蛋白的結合緩沖液中重新懸浮。

a. 對于純化的蛋白，使用1-10微克的蛋白，稀釋在足夠的結合緩沖液中形成50%脂質珠漿液。

b. 對于細胞裂解物、提取物、亞細胞分數：使用大約1毫克的總蛋白對1 mL結合緩沖液。將整個1 mL準備好的樣品加入您洗滌過的珠中。

5. 孵育蛋白-珠溶液1-3小時。孵育可以在室溫或4°C下進行，取決于您蛋白的穩定性。需要連續運動以保持珠懸浮。

6. 沉淀珠并小心移除上清液。如果需要，上清液可以用來監測未結合的蛋白。

7. 用洗滌緩沖液的10倍過量洗滌珠。輕輕混合，孵育1-2分鐘。重復洗滌步驟五次。如果您選擇在結合緩沖液中使用牛血清白蛋白（BSA），請確保在進入下一步之前將其徹底洗出。

8. 在最后一次洗滌后，通過向珠中加入等體積的2X Laemmli樣品緩沖液（或類似物）并加熱至70°C 10分鐘來洗脫結合的蛋白。

9. 加熱后，沉淀珠并移除上清液。將上清液儲存在4°C下，直到分析。丟棄珠。

10. 蛋白可以通過SDS-PAGE分離，并通過凝膠的Coomassie藍染色、蛋白轉移和免疫印跡來檢測感興趣的蛋白，或進行自顯影。

研究應用：

Cardiolipin瓊脂糖珠在研究線粒體功能、線粒體相關疾病、以及線粒體蛋白質的分離和鑒定中發揮著重要作用。它們可以用來富集和純化與心磷脂相互作用的蛋白質，進而分析這些蛋白質的功能。

實驗操作優勢：

使用Cardiolipin瓊脂糖珠進行實驗操作簡便，可以通過簡單的吸附和洗脫步驟來分離目標蛋白。這種方法減少了實驗步驟，提高了實驗效率，并且有助于減少樣本損失。

穩定性和重復性：

Cardiolipin瓊脂糖珠具有良好的化學和物理穩定性，可以在不同的實驗條件下保持一致的性能。這為實驗結果的重復性和可靠性提供了保障。

跨學科研究潛力：

Cardiolipin瓊脂糖珠不僅在生物學研究中有應用，還在醫學、藥理學和環境科學等多個領域展現出其潛力，尤其是在研究線粒體功能障礙相關疾病，如帕金森病。