BioAssay Systems 山梨醇脫氫酶測定試劑盒，用于生物樣本中SDH活性的測定

山梨醇脫氫酶（SDH）是一種能夠催化山梨醇和果糖相互轉化的酶。血液中SDH水平升高表明肝臟受損，因此SDH在肝臟疾病的診斷中發揮著重要作用，尤其是與轉氨酶聯合使用時。此外，SDH水平還可用于評估糖尿病并發癥，例如增殖性糖尿病視網膜病變。

BioAssay Systems的非放射性、比色法SDH檢測試劑盒基于NADH偶聯的酶促反應，將四氮唑鹽MTT還原為其還原形式，該形式在565 nm處有最大吸收峰。565 nm處吸光度的增加與酶活性成正比。

作為BioAssay Systems在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產品山梨醇脫氫酶測定試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

山梨醇脫氫酶測定試劑盒主要特點：

- 快速且靈敏。線性檢測范圍（20 ?L樣本）：12分鐘反應時間為0.1至125 U/L。

- 方便且高通量。均質的“混合-孵育-測量”類型檢測方法。可在高通量篩選液體處理系統上自動化操作，每天可處理數千個樣本。

- 應用范圍：用于生物樣本（例如血漿、血清、尿液、組織和培養基）中SDH活性的測定。

操作步驟：

本檢測基于動力學反應。為確保孵育時間一致，向樣本中加入工作試劑時應迅速，混合應簡短但充分。建議使用多通道移液器。檢測可在任何所需溫度下進行（例如25°C或37°C）。

樣本準備：

- 血清和血漿可直接檢測。

- 組織：解剖前，用磷酸鹽緩沖液（PBS，pH 7.4）沖洗組織以去除血液。將50 mg組織在200 ?L冷PBS緩沖液中勻漿。在4°C下以14,000 x g離心5分鐘，取上清液用于檢測。

- 細胞裂解液：通過在4°C下以2,000 x g離心5分鐘收集細胞。對于貼壁細胞，不要使用蛋白酶酶收獲細胞，而是使用橡膠刮刀。在適量的冷PBS緩沖液中勻漿或超聲處理細胞。在4°C下以14,000 x g離心5分鐘，取上清液用于檢測。

- 所有樣本可在-20至-80°C下保存至少一個月。

試劑準備：將試劑平衡至所需反應溫度（建議37°C）。使用前短暫離心試管。

檢測步驟：

1. 將100 ?L去離子水（ODH?O）和100 ?L校準液（ODCAL）分別加入透明平底96孔板的孔中。

2. 向一個孔中加入20 ?L去離子水，作為空白對照。將每個樣本的20 ?L分別加入其他孔中。

3. 通過混合以下試劑為所有反應孔準備足夠量的工作試劑（WR）：對于每個96孔檢測，混合2 ?L底物、8 ?L NAD/MTT溶液、1 ?L二氮雜菲和75 ?L檢測緩沖液。向所有樣本和空白孔中加入80 ?L WR，輕拍平板以混合均勻。

4. 在所需溫度下孵育；在3分鐘（OD?）和15分鐘（OD??）時，使用平板閱讀器讀取565 nm處的吸光度。

所需材料（但未提供）：

- 移液裝置及配件（例如多通道移液器）、透明平底96孔板（例如Corning Costar）、離心管和平板閱讀器。

文獻參考：

1. Uzozie, A et al (2014). Sorbitol Dehydrogenase overexpression and other aspects of dysregulated protein expression in human precancerous colorectal neoplasms: a quantitative proteomics study.Mol Cell Proteomics. 13(5):1198-1218.

2. Linstad, RI at al (2013). Inhibition of Sorbitol Dehydrogenase by nucleosides and nucleotides. Biochem Biophys Res Commun. 435(2):202-208.

3. Aguayo, MF et al (2013). Sorbitol dehyodrogenase is a cytosolic protein required for sorbitol metabolism in Arabidopsis thalania. Plant Sci. 205-206: 63-75. 

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區的高新技術生物技術公司，專注于研發、生產和銷售高品質的生化檢測試劑盒，產品種類齊全，主要用于科學研究和生物醫藥開發，以滿足生命科學行業日益增長的需求。BioAssay Systems在現代藥物發現領域擁有超過50年的豐富經驗，已經開發了超過250種用于藥物發現和生命科學研究的檢測試劑盒。產品主要包括：1.血液尿液化學；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

作為BioAssay Systems在中國區域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產品。