ALPCO 大鼠高范圍胰島素ELISA試劑盒檢測原理&程序說明

ALPCO大鼠高量程胰島素ELISA用于定量測定大鼠血清和血漿中的胰島素。僅供研究使用。不用于診斷程序。

作為ALPCO在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產品大鼠高范圍胰島素ELISA試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

大鼠高范圍胰島素ELISA試劑盒檢測原理：

ALPCO大鼠高范圍胰島素ELISA是一種夾心型免疫分析法。96孔微孔板被涂覆有特異性針對胰島素的單克隆抗體。標準品、對照品和樣本與結合物一起加入微孔板孔中。然后，微孔板在室溫下放置在微孔板振蕩器上，以700-900轉每分鐘的速度振蕩。第一次孵育完成后，孔被洗滌緩沖液清洗并吸干。加入TMB底物，然后微孔板再次在室溫下以700-900轉每分鐘的速度振蕩。第二次孵育完成后，加入停止液，并通過分光光度計在450納米處測量光密度（OD）。生成的顏色強度與樣本中胰島素的含量成正比。

所需材料

- 用于分配5、75和100微升的精密移液管（帶一次性吸頭）

- 用于分配75和100微升的重復或多通道移液管

- 用于試劑配制的容量瓶和移液管

- 用于試劑配制的蒸餾水或去離子水

- 微孔板洗滌器或洗滌瓶

- 能夠以700-900轉每分鐘速度振蕩的微孔板振蕩器

- 帶有450納米濾光片的微孔板讀數器

- 用于樣本制備的渦旋混合器

注意事項

1. 本試劑盒中包含的人血制品已檢測是否含有HIV（人類免疫缺陷病毒）、HBV（乙型肝炎病毒）和HCV（丙型肝炎病毒）。這些病毒的檢測方法不能保證病毒的絕對不存在；因此，所有試劑應被視為潛在傳染性物質。處理和處置應符合所有適當的國家和地方法規，以處理潛在的生物危害物質。

2. 所有來自動物源的材料均為BSE（瘋牛?。╆幮浴Ｈ欢?，所有材料應被視為潛在傳染性物質。

3. 避免直接接觸皮膚。

4. 本產品不得內服。

5. 使用本產品時，避免進食、飲水或吸煙。

6. 不要使用口吸移液管吸取任何試劑。

7. 試劑盒中的試劑是特定批次的，不得替換。

8. 不要使用超過有效期的試劑。

9. 不建議更改測試程序，可能會影響測試結果。

檢測程序

所有試劑和微孔板條應在使用前平衡至室溫（18-25°C）。使用前輕輕混合所有試劑。每次檢測運行和每次使用多個微孔板時，都必須進行標準曲線的繪制。所有標準品、對照品和樣本應以雙份運行。

1. 在打開鋁箔袋之前，應將微孔板平衡至室溫。為標準品、對照品和樣本的雙份測定指定足夠的微孔板條。剩余的微孔板條應存放在含有干燥劑的密封鋁箔袋中，溫度保持在2-8°C。

2. 將5微升的每種標準品、對照品和樣本分別吸入相應的孔中。有關對照品重組的說明，請參見試劑配制和分析證明。

3. 向每個孔中加入75微升的工作濃度結合物（參見試劑配制）。

4. 用板封蓋住微孔板，在室溫下振蕩700-900轉每分鐘的微孔板振蕩器上孵育2小時。

5. 倒掉孔中的內容物，并使用微孔板洗滌器用350微升的工作濃度洗滌緩沖液（參見試劑配制）洗滌微孔板6次?；蛘撸褂脦в邢礈靽娮斓南礈炱繉⒐ぷ鳚舛认礈炀彌_液注入孔中。（不建議使用多通道移液管。洗滌緩沖液必須以足夠且相等的力量分配，以便正確洗滌孔。）在洗滌之間，丟棄液體，倒置，并在吸水紙上用力拍打微孔板。在最后一次洗滌后（自動或手動），通過倒置并在吸水紙上用力拍打微孔板，去除孔中的任何殘留洗滌緩沖液和氣泡。

6. 向每個孔中加入100微升的TMB底物。

7. 用板封蓋住微孔板，在室溫下振蕩700-900轉每分鐘的微孔板振蕩器上孵育15分鐘。

8. 向每個孔中加入100微升的停止液，并輕輕搖晃微孔板以混合內容物。在進行下一步之前，去除任何氣泡。

9. 將微孔板放入能夠讀取450納米吸光度的微孔板讀數器中。在加入停止液后應立即分析微孔板，且不得超過30分鐘。

典型標準曲線：

以下結果僅用于演示目的，不能代替測定獲得的數據。每次分析運行和平板測試都必須繪制標準曲線。

大鼠胰島素從ng/mL轉換為?IU/mL（國際微量單位）：

1 ng/mL = 24.8 ?IU/mL 1 ?IU/mL = 6.945 pmol/L 

文獻參考：

Finlay JWA, Dillard RF. Appropriate Calibration Curve Fitting in Ligand Binding Assays.AAPS Journal. 2007; 9(2): E260-E267.

ALPCO產品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。

作為ALPCO在中國區域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的ALPCO產品。