ALPCO小鼠超靈敏胰島素ELISA試劑盒(10板)檢測原理&結果計算方案

小鼠超靈敏胰島素ELISA定量檢測小鼠I和小鼠II前胰島素基因中的胰島素蛋白產物，樣本量僅需5 uL的血清或血漿。僅供研究使用，不得用于診斷程序。

對于尾部切片：

僅需5 uL樣本；

動態范圍為0.18-6.9 ng/mL；

靈敏度達到0.115 ng/mL。

對于低胰島素樣本：

僅需25 uL樣本；

動態范圍為0.025-1.25 ng/mL；

靈敏度達到0.019 ng/mL。

ALPCO 小鼠超靈敏胰島素ELISA試劑盒(10板)貨號：ALP-80-INSMSU-E10 的檢測原理：

ALPCO小鼠超靈敏胰島素ELISA是一種夾心型免疫測定。96孔微孔板上涂有特異性針對胰島素的單克隆抗體。標準品、對照品和樣本與標記物一起添加到微孔板孔中。隨后，微孔板在微孔板搖床上以700-900 rpm的速度進行第一次孵育。第一次孵育完成后，使用洗滌緩沖液對孔進行洗滌并吸干。接著加入TMB底物，再次在微孔板搖床上以700-900 rpm的速度進行第二次孵育。一旦第二次孵育完成，加入終止溶液，然后使用分光光度計在450 nm處測量光密度（OD）。生成的顏色強度與樣本中胰島素的含量成正比。

所需材料：

精密移液器（用于分配5、25、75和100 uL，配有一次性吸頭）

重復移液器或多通道移液器（用于分配75和100 uL）

用于試劑制備的量筒和移液器

蒸餾水或去離子水（用于試劑制備）

微孔板洗板機或洗瓶

能達到700-900 rpm的微孔板振蕩器

配有450 nm濾光片的微孔板讀數儀

樣本準備用的渦旋儀

注意事項：

本試劑盒中使用的人的血液產品已經經過HIV（人類免疫缺陷病毒）、HBV（乙型肝炎病毒）和HCV（丙型肝炎病毒）的檢測。檢測方法不能保證病毒的完全不存在，因此所有試劑都應視為潛在的感染性物質。操作和廢棄物處理應符合所有相關的國家和地方對潛在生物危害物質的處理規定。

所有來自動物來源的材料均為BSE陰性。然而，所有材料應避免接觸反芻動物。

避免直接接觸皮膚。

本產品僅限外部使用。

使用本產品時避免進食、飲水或吸煙。

禁止用嘴吸取任何試劑。

本試劑盒中的試劑為特定批號，不能替代使用。

請勿使用過期試劑。

不建議對測試程序進行任何修改，修改可能會影響測試結果。

試劑制備：

所有試劑在制備和后續使用之前必須先回溫至室溫。

結合物儲備液需要與10倍的結合物緩沖液稀釋。例如，為了制備足夠的工作濃度結合物以完成一個微孔板，需將0.9 mL的結合物儲備液（11X）與9 mL的結合物緩沖液稀釋。

洗滌緩沖液濃縮液需要與20倍的蒸餾水稀釋。例如，為了制備工作濃度的洗滌緩沖液，需將20 mL洗滌緩沖液濃縮液（21X）與400 mL去離子水稀釋。工作濃度的洗滌緩沖液在室溫下（18-25°C）穩定保存4周。

對照品（等級1、2、3）以凍干形式提供。請參閱隨每個試劑盒提供的分析證書，獲取適當的去離子水量進行復溶。復溶時，關閉瓶口，輕輕搖勻瓶子，靜置30分鐘后使用。瓶中的內容物應為溶液狀態且無可見顆粒。復溶后的對照品在2-8°C下穩定保存7天。如果需要，可以將其分裝后存放在≤ -20°C下，保存時間最長可達6個月。對照品不應反復凍融。

結果計算

從標準品構建標準曲線，將零標準作為曲線的一部分。建議使用軟件程序計算標準曲線并確定樣品的濃度。推薦使用五參數曲線進行數據分析。

ALPCO小鼠超靈敏胰島素ELISA是一種配體結合檢測，響應與分析物濃度之間呈S形關系。目前公認的此類曲線參考模型使用五參數邏輯（pl）擬合，因為這些模型在更大范圍內優化了準確性和精確性。雖然立方樣條曲線和其他模型也是可接受的方法，但它們通常在濃度范圍的低端和高端顯示較低的實驗內準確性和精確性。

在下面的示例中，使用了五參數邏輯曲線擬合，以最大化低濃度樣品的準確性和精確性。然而，由于個別實驗室條件的影響，所有模型在可檢測范圍的最低和最高端的準確性和精確性都受到限制。因此，在解釋分析物響應變得非線性時，應始終謹慎。

不建議推測樣品濃度值超出標準濃度值的范圍。

典型標準曲線

以下結果僅供演示使用，不能替代通過檢測獲得的數據。每次檢測和測試的板上都必須進行標準曲線的測定。

ALPCO公司從成立初期就致力于生物醫藥領域各種免疫檢測試劑盒的研發與生產，力求為廣大客戶提供高質量的免疫檢測產品。ALPCO產品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、 內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。艾美捷科技是ALPCO的中國代理商，為科研工作者提供優質的產品與服務。