ALPCO 胰島素化學發光ELISA試劑盒(10板)的檢測原理及結果計算

ALPCO胰島素化學發光酶聯免疫吸附測定（ELISA）用于定量檢測人血清、肝素化血漿和細胞培養上清液中的胰島素。

作為ALPCO在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產品胰島素化學發光ELISA試劑盒(10板)。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

胰島素化學發光ELISA試劑盒(10板)檢測原理：

ALPCO胰島素化學發光ELISA是一種夾心免疫分析法。96孔微孔板涂有一層特異性針對胰島素的單克隆抗體。將標準品、質控品和樣品與結合物一起加入微孔板孔中，然后在室溫下于微孔板振蕩器上以700-900轉/分鐘的速度孵育。第一次孵育完成后，用洗滌緩沖液清洗孔并吸干。然后加入鏈霉親和素-辣根過氧化物酶（SA-HRP）進行第二次室溫孵育，孵育時微孔板振蕩器速度為700-900轉/分鐘。孵育完成后，再次用洗滌緩沖液清洗孔并吸干。加入化學發光底物，5分鐘后用化學發光微孔板讀數儀讀取結果。產生的光強度與樣品中胰島素的量成正比。  

*請參考每套試劑盒附帶的分析證書以獲取更多信息。

所需材料 

- 精密移液器，用于分裝10-100微升（配一次性吸頭）  

- 重復或多通道移液器，用于分裝最多100微升  

- 容量瓶和移液器，用于試劑配制  

- 蒸餾水或去離子水，用于試劑配制  

- 微孔板清洗器或洗瓶  

- 能達到700-900轉/分鐘的微孔板振蕩器  

- 配有化學發光檢測功能的微孔板讀數儀

注意事項 

1. 本試劑盒中包含的人類血液制品已檢測HIV（人類免疫缺陷病毒）、HBV（乙型肝炎病毒）和HCV（丙型肝炎病毒）。這些病毒的檢測方法不能保證病毒的完全不存在，因此所有試劑應被視為潛在傳染性物質。處理和丟棄應遵守所有適用的國家和地方關于潛在生物危害材料處理的規定。  

2. 來自動物源的所有材料均為瘋牛病（BSE）陰性。然而，所有材料仍應被視為潛在傳染性物質。  

3. 避免與皮膚直接接觸。  

4. 本產品不可內服。  

5. 使用本產品時，避免進食、飲水或吸煙。  

6. 不要使用嘴進行任何試劑的移液操作。  

7. 本試劑盒中的試劑具有批號特異性，不得替換。  

8. 不要使用過期的試劑。  

9. 不建議對檢測程序進行更改，這可能會影響檢測結果。  

10. 附錄中提供了用于讀取化學發光輸出的儀器設置示例。每個實驗室應根據儀器制造商的說明優化其儀器設置。請與微孔板讀數儀制造商的技術服務部門聯系，以獲取最佳儀器設置。

典型標準曲線 

以下結果僅用于演示目的，不能代替通過檢測獲得的數據。每次檢測運行和測試的板都需要進行標準曲線檢測，數據分析采用1/y?加權的五參數曲線擬合。

儲存條件 

試劑盒應儲存于2-8°C。試劑盒有效期至包裝標簽上的過期日期。

結果計算 

根據標準品構建標準曲線。建議使用軟件程序計算標準曲線并確定樣品濃度。推薦使用1/y?加權的五參數曲線擬合進行數據分析。  

胰島素化學發光ELISA是一種配體結合分析法，其反應與分析物濃度呈S形關系。目前接受的此類曲線參考模型使用四參數或五參數邏輯斯蒂（PL）擬合，因為這些模型能夠在更廣泛的范圍內優化準確性和精確性。  

使用1/y?加權的五參數曲線擬合是為了最大化低濃度樣品的準確性和精確性。然而，由于個體實驗室條件的影響，所有模型在可檢測范圍的最低端和最高端的準確性和精確性都受到限制。因此，在解釋分析物反應呈非線性時，應始終謹慎。  

不建議將樣品濃度值外推到標準濃度范圍之外。

預期值 

胰島素化學發光ELISA已校準至WHO胰島素第一國際參考制劑66/304。  

人胰島素從pg/mL換算到?IU/mL（微國際單位）的換算關系為：  

34.8 pg/mL = 1 ?IU/mL  

34.8 ?g = 1 IU = 6 nmol

文獻參考：

1. Finlay JWA, Dillard RF. Appropriate Calibration Curve Fitting in Ligand Binding Assays.AAPS Journal. 2007; 9(2): E260-E267. 

ALPCO產品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。

作為ALPCO在中國區域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的ALPCO產品。