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ALPCO IgE(大鼠)ELISA, 96孔,滿足高通量實驗需求,提供高效的IgE定量分析

發布者:艾美捷科技    發布時間:2024-10-11     
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大鼠IgE ELISA是一種高靈敏度的雙位點酶聯免疫測定法(ELISA),用于測量大鼠血清或血漿中的IgE。


作為ALPCO在中國的區域總代理,艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產品IgE(大鼠)ELISA, 96孔。產品僅用于科研,不可用于臨床診斷。

產品名稱貨號詳情

IgE(大鼠)ELISA, 96孔

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IgE(大鼠)ELISA, 96孔檢測原理:

雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗(ELISA)的原理如圖1所示。在這個檢測中,樣本中存在的IgE與已經吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗IgE抗體發生反應。洗滌去除未結合的蛋白質后,加入與辣根過氧化物酶(HRP)結合的抗IgE抗體。這些酶標記的抗體與之前結合的IgE形成復合物。經過另一次洗滌步驟,通過添加顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯苯胺(TMB)來檢測與免疫吸附劑結合的酶。結合酶的量與被測試樣本中IgE的濃度成正比;因此,450納米處的吸光度是測試樣本中IgE濃度的量度。測試樣本中的IgE量可以通過從標準品構建的標準曲線進行插值,并根據樣本稀釋進行校正。

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試劑(足夠進行96次測定的數量)

稀釋液濃縮液(測定緩沖液) 一瓶含有50 mL的5倍濃縮稀釋測定緩沖液。

洗滌液濃縮液 一瓶含有50 mL的20倍濃縮洗滌液。

酶-抗體結合物 100倍 一瓶含有150 ?L的親和純化的抗大鼠IgE抗體與辣根過氧化物酶結合的穩定緩沖液。

顯色底物溶液 一瓶含有12 mL的3,3',5,5'-四甲基聯苯胺(TMB)和過氧化氫在檸檬酸緩沖液中,pH值為3.3。

終止液 一瓶含有12 mL的0.3 M硫酸。警告:避免與皮膚接觸。

抗大鼠IgE ELISA微孔板 十二個可移除的八孔(8)微孔條在孔架框中。每個孔都涂有親和純化的抗大鼠IgE。

大鼠IgE校準物 一瓶含有凍干的大鼠IgE校準物。


試劑準備

稀釋液濃縮液 提供的稀釋液是5倍濃縮液,必須用蒸餾水或去離子水按1:5稀釋(1份緩沖液濃縮液,4份dH2O)。

洗滌液濃縮液 提供的洗滌液是20倍濃縮液,必須用蒸餾水或去離子水按1:20稀釋(1份緩沖液濃縮液,19份dH2O)。當儲存溫度較低時,濃縮液中出現結晶并不罕見。在稀釋前將濃縮液加熱至30-35°C可以溶解結晶。

酶-抗體結合物 通過向每個微孔板測試條添加10 ?L酶-抗體結合物至990 ?L的1X稀釋液中,計算每個微孔板測試條所需的工作結合物溶液量。均勻混合,但要輕柔。避免起泡。

顯色底物溶液 按提供的狀態即開即用。

終止液 按提供的狀態即開即用。

抗大鼠IgE ELISA微孔板 按提供的狀態即開即用。揭開微孔板袋,從袋中取出板。移除在測定中不會使用的條和孔,放回袋中并重新密封,連同干燥劑。

大鼠IgE校準物 請參考分析證書以準備大鼠IgE校準物。


結果

從每個樣本的測試值中減去平均背景值。

使用標準品觀察到的結果構建標準曲線。適當的曲線擬合是四參數邏輯曲線。也可以使用二階多項式(二次)或其他曲線擬合。

從標準曲線中插值測試樣本值。校正血清稀釋因子,以得出原始樣本中的IgE濃度。


程序的限制

當按照包裝說明書中的信息完全理解并遵循良好的實驗室操作實踐進行測定程序時,將獲得可靠和可重復的結果。

可能影響測定性能的因素包括儀器功能的正常運行、玻璃器皿的清潔度、蒸餾水或去離子水的質量、試劑和樣本移液的準確性、洗滌技術、孵育時間或溫度。

不要將試劑與其他批次或來源的試劑混合或替換。


ALPCO產品種類多樣,可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等,涉及神經生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域,尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。


作為ALPCO在中國區域的代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的ALPCO產品。


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