ALPCO IgE ELISA：精確測量血清和血漿樣本中的免疫球蛋白E水平

IgE檢測試劑盒是一種高靈敏度的雙位點酶聯免疫測定法（ELISA），用于定量測定人血漿和血清樣本中的免疫球蛋白E（IgE）。用于研究用途只有。不用于診斷程序。

作為ALPCO在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產品IgE ELISA。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

IgE ELISA檢測原理：

雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗（ELISA）的原理在圖1中展示。在這個檢測中，樣本中存在的IgE與已經吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗IgE抗體發生反應。經過洗滌去除未結合的蛋白質后，加入與辣根過氧化物酶（HRP）結合的抗IgE抗體。這些酶標記的抗體與之前結合的IgE形成復合物。在另一個洗滌步驟之后，通過添加顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯苯胺（TMB）來檢測與免疫吸附劑結合的酶。結合酶的量與被測試樣本中IgE的濃度成正比；因此，450納米處的吸光度是測試樣本中IgE濃度的量度。測試樣本中的IgE量可以通過從標準品構建的標準曲線進行插值，并根據樣本稀釋進行校正。

未提供但必需的材料

? 精密移液管（2 ?L至1000 ?L）用于制作和分發稀釋液

? 試管

? 噴霧瓶或微孔板洗滌/抽吸器

? 蒸餾水或去離子水

? 微孔板讀數器

? 用于準備試劑和緩沖溶液的各種玻璃器皿

? 計時器

? 抗凝劑（用于血漿樣本收集）

? 離心機

樣本收集和處理

所有血液成分和生物材料應視為潛在危險物品。在處理和處置時遵循通用預防措施。

如果血液樣本出現凝血、嚴重溶血、脂血，或樣本的完整性受到關注，應做記錄并謹慎解釋結果。

下面列出的樣本收集和儲存條件是作為一般指導方針。樣本的穩定性尚未評估。

? 血清樣本：應通過靜脈穿刺收集血液。血液凝固后通過離心分離血清。移除血清并立即進行檢測或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復凍融循環。

? 血漿樣本：應將血液收集到含有抗凝劑的容器中，然后進行離心。立即進行檢測或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復凍融循環。

? 已知干擾物質：疊氮化物和硫柳汞在高于0.1%的濃度下會抑制酶反應。

樣本稀釋

檢測要求在使用前對每個測試樣本進行稀釋。每次進行檢測時，所有樣本都應以雙份進行檢測。推薦的稀釋比例僅供參考。稀釋比例應基于未知樣本的預期濃度，以便稀釋后的樣本落在標準曲線的動態范圍內。如果不確定樣本值，在運行整個板之前，強烈建議對一個或兩個代表性樣本進行連續稀釋。

? 血清和血漿樣本 - 推薦的起始稀釋比例為1:200。要準備1:200的樣本稀釋液，將2 ?L的樣本轉移到398 ?L的1X稀釋液中。這樣就得到了1:200的稀釋液。徹底混合。

結果計算

從所有孔的測試值中減去平均背景值（標準零的平均吸光度讀數）。

對每個標準的平均讀數進行平均，并使用結果構建標準曲線。通過使用能夠生成四參數邏輯曲線擬合的計算機軟件來減少數據構建標準曲線。也可以使用二階多項式（二次）或其他曲線擬合；然而，它們對數據的擬合將不夠精確。

從標準曲線中插值測試樣本值。校正血清稀釋因子，以得出原始樣本中的IgE濃度。

附錄A – 參考血清信息

本試劑盒中包含一瓶參考血清。請參閱隨附的產品資料表以獲取批次特定信息。請注意以下事項：

參考血清可以在2-8°C下儲存長達1周，如果儲存時間更長，則必須冷凍。如果正確儲存，直到有效期前都是穩定的。

參考血清應適當稀釋以適應標準曲線。請參閱產品資料表以獲取稀釋說明。

在移液樣本（程序部分）時，也要以雙份移液參考血清。

ALPCO產品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。

作為ALPCO在中國區域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的ALPCO產品。