ALPCO 小鼠半胱氨酸蛋白酶抑制劑C ELISA樣品的收集和處理

半胱氨酸蛋白酶抑制劑C檢測試劑盒是一種高靈敏度的雙位點酶聯免疫測定法（ELISA），用于檢測小鼠血漿和血清樣本中半胱氨酸蛋白酶抑制劑C的測定。

作為ALPCO在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產品小鼠半胱氨酸蛋白酶抑制劑C ELISA。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

小鼠半胱氨酸蛋白酶抑制劑C ELISA檢測原理：

如圖1所示，在這種測定中，樣品中的Cystatin C與已吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗Cystatin C抗體反應。通過洗滌去除未結合的蛋白質后，加入與辣根過氧化物酶（HRP）偶聯的抗Cystatin C抗體。這些酶標記的抗體與之前結合的Cystatin C形成復合物。經過另一次洗滌步驟后，通過添加顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯苯胺（TMB）來測定結合的酶。結合的酶量與樣品中測試的Cystatin C濃度直接相關；450納米處的吸光度是測試樣品中Cystatin C濃度的量度。測試樣品中的Cystatin C量可以從標準曲線中插值得出，并根據樣品稀釋進行校正。

樣品收集和處理：

所有血液成分和生物材料應被視為潛在危險。

處理和處置時遵循通用預防措施。

如果血液樣品出現凝固、嚴重溶血、脂血或樣品完整性有問題，請做好記錄，并謹慎解釋結果。

下面列出的樣品收集和儲存條件僅供參考。

樣品穩定性尚未評估。

血清樣品：應通過靜脈穿刺采集血液。血液凝固后，通過離心分離血清。移除血清并立即檢測或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復凍融循環。

血漿樣品：應將血液采集到含有抗凝劑的容器中，然后進行離心。立即檢測或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復凍融循環。

已知干擾物質：濃度高于0.1%的疊氮化物和硫柳汞會抑制酶反應。

樣品稀釋：

測定要求每個測試樣品在使用前進行稀釋。每次進行測定時，所有樣品應以雙份進行測定。推薦的稀釋比例僅供參考。稀釋應基于未知樣品的預期濃度，以使稀釋后的樣品落在標準曲線的動態范圍內。如果不確定樣品值，在運行整個板之前，對一個或兩個代表性樣品進行系列稀釋是非常推薦的。

血清樣品：建議的起始稀釋比例是1:2,000。要制備1:2,000的樣品稀釋液，將5微升的樣品轉移到495微升的1X稀釋液中。這會產生1:100的稀釋液。徹底混合。接下來，將1:100的樣品取30微升轉移到570微升的1X稀釋液中。這會產生1:2,000的稀釋液。徹底混合。

血漿樣品：建議的起始稀釋比例是1:4,000。要制備1:4,000的樣品稀釋液，將5微升的樣品轉移到495微升的1X稀釋液中。這會產生1:100的稀釋液。徹底混合。接下來，將1:100的樣品取20微升轉移到780微升的1X稀釋液中。這會產生1:4,000的稀釋液。徹底混合。

試劑準備：

使用前將所有試劑置于室溫（16°C至25°C）。

稀釋液濃縮液 - 提供的稀釋液為5倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水（1份緩沖液濃縮液，4份dH2O）稀釋1:5。

洗滌液濃縮液 - 提供的洗滌液為20倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水（1份緩沖液濃縮液，19份dH2O）稀釋1:20。濃縮液在儲存溫度較低時可能會有結晶形成。稀釋前將濃縮液加熱至30-35°C可以溶解晶體。

酶-抗體結合物 - 通過向每個微孔板測試條添加10微升酶-抗體結合物至990微升1X稀釋液中，計算每個微孔板測試條所需的工作結合物溶液量。使用前立即稀釋并避光。均勻但輕柔地混合。避免起泡。

預包被ELISA微孔板 - 按提供使用即可。打開箔袋，從袋中取出板。取出在測定中不會使用的條和孔，放回袋中并重新密封，連同干燥劑。

小鼠CYS校準液 - 根據批特定分析證明書準備。

ALPCO產品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。

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