ALPCO 載脂蛋白H (APOH) ELISA試劑盒樣品稀釋&試劑準備方案

Apo-H檢測試劑盒是一種高靈敏度的雙位點酶聯免疫測定法（ELISA），用于測量人類樣本中的載脂蛋白-H。

作為ALPCO在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產品載脂蛋白H (APOH) ELISA試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

載脂蛋白H (APOH) ELISA試劑盒檢測原理：

如圖1所示，在這種測定中，樣品中存在的載脂蛋白H（Apo-H）與已吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗Apo-H抗體反應。通過洗滌去除未結合的蛋白質后，加入與辣根過氧化物酶（HRP）偶聯的抗Apo-H抗體。這些酶標記的抗體與之前結合的Apo-H形成復合物。經過另一次洗滌步驟后，通過添加顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯苯胺（TMB），檢測免疫吸附劑上的酶。結合的酶量與測試樣品中Apo-H的濃度直接相關。因此，450納米處的吸光度是測試樣品中Apo-H濃度的量度。測試樣品中的Apo-H量可以從標準曲線中插值得到，并根據樣品稀釋進行校正。

樣品收集和處理

所有血液成分和生物材料應視為潛在危險物。處理和處置時應遵循通用預防措施。

如果血液樣品出現凝固、嚴重溶血、脂血或樣品完整性受到懷疑，請做好記錄，并謹慎解釋結果。

以下列出的樣品收集和儲存條件僅供參考。樣品的穩定性尚未評估。

- 血清樣品：應通過靜脈穿刺收集血液。通過離心分離血清和細胞。取出血清并立即檢測或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復凍融。

- 血漿樣品：應將血液收集到含有抗凝劑的容器中，然后進行離心。立即檢測或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復凍融。

- 尿液樣品：使用無菌或清潔的尿液收集器收集中段尿液。離心以去除細胞碎片。立即檢測或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復凍融。

- 已知干擾物質：濃度高于0.1%的疊氮化物和硫柳汞會抑制酶反應。

樣品稀釋

該檢測要求每個測試樣品在使用前進行稀釋。每次進行檢測時，所有樣品都應以雙份量進行檢測。推薦的稀釋比例僅供參考。稀釋應基于未知樣品的預期濃度，以使稀釋后的樣品落在標準曲線的動態范圍內。如果不確定樣品值，強烈建議在運行整個板之前，先對一個或兩個代表性樣品進行系列稀釋檢測。

- 血清和血漿樣品 - 建議起始稀釋比例為1:10,000。要制備1:10,000的樣品稀釋液，將5微升樣品轉移到495微升的1X稀釋液中。這會產生1:100的稀釋。接下來，將1:100的樣品通過將5微升轉移到495微升的1X稀釋液中進行稀釋。這會產生1:10,000的稀釋。每個階段都要徹底混合。

試劑準備

- 使用前將所有試劑置于室溫（16°C至25°C）。

- 稀釋液濃縮物 - 提供的稀釋液是5倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水（1份緩沖液濃縮物，4份dH2O）稀釋1:5。

- 洗滌液濃縮物 - 提供的洗滌液是20倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水（1份緩沖液濃縮物，19份dH2O）稀釋1:20。濃縮物在低溫儲存時可能會形成晶體。稀釋前將濃縮物加熱至30-35°C可以溶解晶體。

- 酶-抗體結合物 - 計算每個微孔板測試條所需的工作結合物溶液量，為每個測試條添加10微升酶-抗體結合物至990微升的1X稀釋液中。使用前立即稀釋并避光。均勻混合，但要輕柔。避免產生泡沫。

- 預包被ELISA微孔板 - 按提供的狀態使用。揭開鋁箔袋，從袋中取出板。取出測試中不會使用的條和孔，放回袋中并重新密封，同時放回干燥劑。

- 人Apo-H校準品 - 根據特定批次的分析證明書準備。

ALPCO產品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。

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