ALPCO 小鼠白蛋白ELISA：從樣本收集到數據分析的詳細流程

小鼠白蛋白ELISA是一種高靈敏度的雙位點酶聯免疫測定法（ELISA），用于測量小鼠血清、血漿和尿液中的白蛋白。僅供研究使用。不適用于診斷程序。

作為ALPCO在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產品小鼠白蛋白ELISA。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

小鼠白蛋白ELISA檢測原理：

雙抗體夾心酶聯免疫吸附測定（ELISA）的原理如圖1所示。在這種檢測中，樣品中的白蛋白與已吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗白蛋白抗體反應。通過洗滌去除未結合的蛋白質后，加入與辣根過氧化物酶（HRP）偶聯的抗白蛋白抗體。這些酶標記的抗體與之前結合的白蛋白形成復合物。經過另一次洗滌步驟后，通過添加顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯苯胺（TMB），檢測免疫吸附劑上的酶。結合的酶量與測試樣品中白蛋白的濃度直接相關；因此，450納米處的吸光度是測試樣品中白蛋白濃度的量度。測試樣品中的白蛋白量可以從標準曲線中插值得到，并根據樣品稀釋進行校正。

操作程序的局限性

當完全理解隨附說明書中的信息，并遵守良好的實驗室操作規范時，可以獲得可靠和可重復的結果?？赡苡绊憴z測性能的因素包括儀器功能、玻璃器皿的清潔度、蒸餾水或去離子水的質量、試劑和樣品移液的準確性、洗滌技術、孵育時間或溫度。不要將不同批次或來源的試劑混合或替換。

需要但未提供的物料

- 精密移液器（2微升至1000微升），用于制備和分發稀釋液

- 試管

- 噴霧瓶或微孔板洗滌/抽吸器

- 蒸餾水或去離子水

- 微孔板讀取器

- 制備試劑和緩沖溶液所需的各種玻璃器皿

- 計時器

- 離心機

- 抗凝劑（用于血漿樣品收集）

樣品收集和處理

所有血液成分和生物材料應視為潛在危險物。處理和處置時應遵循通用預防措施。

如果血液樣品出現凝固、嚴重溶血、脂血或樣品完整性受到懷疑，請做好記錄，并謹慎解釋結果。

以下列出的樣品收集和儲存條件僅供參考。樣品的穩定性尚未評估。

- 血清樣品：應通過靜脈穿刺收集血液。通過離心分離血清和細胞。取出血清并立即檢測或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復凍融。

- 血漿樣品：應將血液收集到含有抗凝劑的容器中，然后進行離心。立即檢測或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復凍融。

- 尿液樣品：使用無菌或清潔的尿液收集器收集中段尿液。離心以去除細胞碎片。立即檢測或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復凍融。

- 已知干擾物質：濃度高于0.1%的疊氮化物和硫柳汞會抑制酶反應。

結果計算

1. 從所有孔的測試值中減去平均背景值（標準零的平均吸光度讀數）。

2. 對每個標準的平均重復讀數取平均值，并使用結果構建標準曲線。通過使用能夠生成四參數邏輯（4-PL）曲線擬合的計算機軟件來減少數據，構建標準曲線。也可以使用二階多項式（二次）或其他曲線擬合，但它們對數據的擬合將不夠精確。

3. 從標準曲線中插值得到測試樣品值。校正稀釋因子，以得到原始樣品中的白蛋白濃度。

附錄A - 參考血清信息

本試劑盒中包含一瓶參考血清。請參閱隨附的產品概況表以獲取特定批次的信息。請注意以下幾點：

1. 收到參考血清后應立即冷凍。如果儲存得當，直到過期日期都是穩定的。

2. 參考血清應適當稀釋，以適應標準曲線范圍。請參閱協議中的“樣品稀釋”部分的說明。

3. 在移液樣品（操作程序部分）時，也要以雙份量移液參考血清。

ALPCO產品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。

作為ALPCO在中國區域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的ALPCO產品。