ALPCO 抗LKM-1 ELISA實驗室指南：高靈敏度與特異性表現

抗LKM-1（肝腎微粒體）（IgG）ELISA是一種固相酶免疫測定法，采用重組人細胞色素p450 IID6用于抗體的定量和定性檢測抗人血清中的肝腎微粒體（LKM）。該檢測是研究自身免疫的工具肝炎（AIH）。該測定不用于診斷程序。

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抗LKM-1 ELISA檢測原理：

血清樣本稀釋至1:101后，在涂有特定抗原的微孔板中孵育。

如果樣本中存在抗體，它們會與抗原結合。未結合的部分在隨后的步驟中被洗掉。之后，與辣根過氧化物酶（HRP）結合的抗人免疫球蛋白（結合物）被孵育，并與微孔板中樣本的抗原-抗體復合物反應。未結合的結合物在隨后的步驟中被洗掉。加入TMB底物后，會產生一個酶促比色（藍色）反應，這種反應可以通過稀釋的酸停止（顏色變為黃色）。從色原生成的顏色強度是與抗原-抗體復合物結合的結合物數量的函數，這與樣本中相應抗體的初始濃度成正比。

試劑盒組成：

需要重新配制的：

5倍樣本緩沖液1瓶，20毫升 - 5倍濃縮（白色瓶蓋：黃色溶液）

成分：Tris, NaCl, 牛血清白蛋白（BSA）, 疊氮化鈉 < 0.1%（防腐劑）

50倍洗滌緩沖液1瓶，20毫升 - 50倍濃縮（白色瓶蓋：綠色溶液）

成分：Tris, NaCl, 吐溫20, 疊氮化鈉 < 0.1%（防腐劑）

即用型：

低濃度對照1瓶，1.5毫升（綠色瓶蓋：無色溶液）

成分：人血清（稀釋），牛血清白蛋白（BSA）, 疊氮化鈉 < 0.1%（防腐劑）

高濃度對照1瓶，1.5毫升（紅色瓶蓋：黃色溶液）

成分：人血清（稀釋），牛血清白蛋白（BSA）, 疊氮化鈉 < 0.1%（防腐劑）

校準液1瓶，1.5毫升（藍色瓶蓋：黃色溶液）

成分：人血清（稀釋），牛血清白蛋白（BSA）, 疊氮化鈉 < 0.1%（防腐劑）

標準品6瓶，每瓶1.5毫升（每瓶白色瓶蓋：黃色溶液*）

每個標準品的濃度：0, 3, 10, 30, 100, 300 U/ml

成分：人血清（稀釋），牛血清白蛋白（BSA）, 疊氮化鈉 < 0.1%（防腐劑）

結合物1瓶，15毫升IgG（藍色瓶蓋：藍色溶液）

成分：與辣根過氧化物酶結合的抗人免疫球蛋白，牛血清白蛋白（BSA）

TMB底物1瓶，15毫升（黑色瓶蓋：無色溶液）

成分：穩定的四甲基聯苯胺和過氧化氫（TMB/H2O2）

停止液1瓶，15毫升（白色瓶蓋：無色溶液）

成分：1M鹽酸

微孔板12 x 8孔條，帶有可拆卸的微孔

涂覆請參見第1段

儲存和保質期

將所有試劑和微孔板儲存在2-8°C/35-46°F的條件下，存放在原始容器中。一旦配制好，重新配制的溶液在2-8°C/35-46°F下可穩定保存1個月。試劑和微孔板只能在每個組件上標示的有效期內使用。避免將TMB溶液暴露在強烈光線下。將微孔板存放在指定的鋁箔中，包括干燥劑，并密封緊密。

文獻參考：

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AutoimmuneHepatitis.

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ALPCO產品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。

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