ALPCO fT3 (Free-Triiodothyronine) EIA* 試劑盒, (96 孔)結果計算方案

用于定量測定人血清中游離三碘甲狀腺原氨酸（fT3）濃度。僅供研究使用。不用于診斷程序。

作為ALPCO在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產品fT3 (Free-Triiodothyronine) EIA* 試劑盒, (96 孔)。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

fT3 (Free-Triiodothyronine) EIA* 試劑盒, (96 孔)檢測原理：

fT3檢測是一種固相競爭酶免疫測定法。將血清樣本、標準品和T3酶偶聯物工作試劑加入涂有單克隆T3抗體的孔中。樣品中的游離T3和T3標記的綴合物競爭抗體上的可用結合位點。在室溫下孵育60分鐘后，用水洗滌孔以去除未結合的T3綴合物。然后加入TMB底物并孵育20分鐘，導致藍色的發展。通過加入停止溶液停止顯色，并在450nm處用分光光度法測量吸光度。形成的顏色強度與存在的酶的量成正比，與樣品中未標記的fT3的量成反比。通過參考一系列以相同方式測定的fT3標準品，對未知樣品中的fT3濃度進行定量。

試劑

試劑盒提供的材料：

- 抗體涂層微孔板（1板，96孔）

  微孔板孔涂有抗T3抗體

- fT3-酶結合物試劑，即用型（1瓶，10.5 mL）

  含有與辣根過氧化物酶結合的T3抗體和防腐劑

- 自由T3參考標準套裝（1.0 mL/瓶）

  含有人血清中的0, 0.9, 2.2, 5.0, 9.0 和 19.0 pg/mL的fT3，含防腐劑；液體，即用型。具體水平在批次特定的標簽上給出。

- 顯色試劑A（1瓶，13 mL）

  含有醋酸緩沖液中的過氧化氫

- 顯色試劑B（1瓶，13 mL）

  含有在緩沖溶液中穩定的3,3',5,5'四甲基聯苯胺（TMB）

- 停止溶液（3N鹽酸）（1瓶，10 mL）

  含有稀釋的鹽酸

需要但不提供的試劑：

- 能夠提供50 ?L體積，精度優于1.5%的移液管

- 能夠重復提供50 ?L和200 ?L體積，精度優于1.5%的分配器

- 具有450 nm波長吸收能力的微孔板讀取器

- 用于稀釋酶結合物和混合顯色試劑A與顯色試劑B的試管

- 用于吸干微孔板孔的吸水紙

- 計時器

- 質量控制材料

樣本收集和準備

應從通過可接受技術獲得的全血樣本中制備血清。此試劑盒僅用于無添加劑的血清樣本。血清樣本可在2-8°C下冷藏，最長時間48小時。如果樣本無法在48小時內測定，它們可以儲存在-20°C下，長達30天。

試劑盒和儀器的儲存

未開封的試劑盒在收到后應存放在2-8°C，并應將微孔板保存在帶有干燥劑的密封袋中，以盡量減少潮濕空氣的接觸。按照上述描述儲存的開封試劑盒，直到顯示的有效期前都保持穩定。在450 nm波長下，具有10 nm或更小帶寬和0-2 OD或更大光密度范圍的微孔板讀取器適用于吸收測量。

標準曲線示例：

結果計算1。計算每組參考標準品、對照品和樣品的平均吸光度值（A450）。通過在方格紙上繪制每個參考標準的平均吸光度與其濃度（單位為pg/mL）的關系圖，構建標準曲線，吸光度值在垂直軸或Y軸上，濃度在水平軸或X軸上。使用每個樣品的平均吸光度值從標準曲線中確定相應的fT3濃度，單位為pg/mL

ALPCO產品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。

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