Advanced BioMatrix 膠原蛋白雜交肽，CY3 結合物（紅色）的應用和特點

三螺旋是膠原蛋白的標志性蛋白質結構。在組織重塑過程中，三螺旋膠原蛋白分子被特定蛋白酶（例如 MMP 或組織蛋白酶 K）降解，并在體溫下展開。膠原蛋白雜交肽 (CHP) 是一種合成肽，無論在組織學、體內還是體外（3D 細胞培養物）中，都可以通過氫鍵與此類變性膠原蛋白鏈特異性結合。通過共享天然膠原蛋白的結構基序和 Gly-XY 重復序列，CHP 具有與變性膠原蛋白鏈雜交的強大能力，其方式類似于 PCR 過程中 DNA 片段與其互補 DNA 鏈退火。 CHP是一種針對未折疊膠原蛋白分子的極其特異性的探針：由于缺乏結合位點，它對完整膠原蛋白分子的親和力可以忽略不計；由于其中性和親水性，它對非特異性結合也呈惰性。

艾美捷科技強烈推薦Advanced BioMatrix熱銷產品膠原蛋白雜交肽，CY3 結合物（紅色）。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

膠原蛋白雜交肽，CY3 結合物（紅色）概念驗證結果：

A. 用F-CHP（15微米，過夜4°C孵育）染色的豬韌帶冰凍切片的熒光顯微圖。右側面板顯示的樣本經過熱水處理，有意使膠原變性。可以在變性樣本中檢測到與膠原結合的F-CHP的顯著熒光信號，而在完整切片中看不到信號，表明CHP對變性膠原鏈具有高特異性。兩個樣本在相同條件下染色和成像。比例尺：200微米。

B. 冷凍豬韌帶切片顯示了完整（中間）和熱變性組織樣本（左側）之間R-CHP結合的顯著差異。與預熱的單體R-CHP（左側）相比，未經預熱步驟使用的三螺旋R-CHP（右側）結合顯著減少。比例尺：1000微米。藍色：DAPI染色的細胞核。

C. 經過熱介導的抗原檢索后，用B-CHP通過免疫組織化學在福爾馬林固定（FFPE）的豬韌帶切片中非熒光地可視化完整的膠原含量，進一步通過NeutrAvidin的辣根過氧化物酶（HRP）共軛檢測。比例尺：200微米。

D. CHP可以在SDS-PAGE凝膠（凝膠內Western印跡）中特異性地檢測膠原條帶。在洗去SDS后，含有膠原I（1微克）和3T3成纖維細胞裂解物的SDS-PAGE凝膠被F-CHP染色（左側，由熒光凝膠成像儀成像，λex = 488 nm）。同一凝膠隨后被考馬斯亮藍染色并拍照（右側）。左側圖像中裂解物和分子標記條帶的缺失顯示了CHP對膠原鏈結合的顯著特異性。

文獻參考：

[1] Targeting and mimicking collagens via triple helical peptideassemblies. Current Opinion in Chemical Biology, 2013, 17,968–975.

[2] In situ imaging of tissue remodeling with collagen hybridizingpeptides. ACS Nano, 2017, 11, 9825–9835.

[3] Targeting collagen strands by photo-triggered triple-helixhybridization. Proceedings of the National Academy ofSciences of the United States of America, 2012, 109, 14767–14772.

[4] Visualizing collagen proteolysis by peptide hybridization:From 3D cell culture to in vivo imaging. Biomaterials, 2018,183, 67–76.

[5] Direct detection of collagenous proteins by fluorescentlylabeled collagen mimetic peptides. Bioconjugate Chemistry,2013, 24, 9–16.

[6] Molecular level detection and localization of mechanicaldamage in collagen enabled by collagen hybridizingpeptides. Nature Communications, 2017, 8, 14913, doi:10.1038/ncomms14913.

[7] Molecular assessment of collagen denaturation indecellularized tissues using a collagen hybridizing peptide.Acta Biomaterialia, 2017, 53, 268–278.

美國Advanced BioMatrix是3D組織培養、細胞檢測和細胞增殖等領域實驗解決方案的佼佼者，在分離、純化、凍干、細胞培養和蛋白檢測、多肽粘附、附著因子、基質硬度和其他3D matrix 產品開發方面有著豐富的經驗。

產品競爭優勢：

. 提供高純度和成分確定的胞外基質；

. 超過1000余篇文獻引用PureCol 膠原產品，品質非常均一；

. 在3D培養基領域可提供全面的產品線；

. 可提供特異性剛性有機硅基板的公司（CytoSoft）;

. 可提供可溶性絲纖蛋白的供應商（可運用于多種3D培養）；

. 如果客戶首次接觸3D膠原凝膠，Advanced BioMatrix是預制膠原蛋白(PureCol EZ gel)供應商。