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Advanced BioMatrix膠原蛋白雜交肽、生物素結合物(生物素)解決方案

發布者:艾美捷科技    發布時間:2024-02-21     
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三螺旋是膠原蛋白的標志性蛋白質結構。在組織重塑過程中,三螺旋膠原蛋白分子被特定蛋白酶(例如 MMP 或組織蛋白酶 K)降解,并在體溫下展開。膠原蛋白雜交肽 (CHP) 是一種合成肽,無論在組織學、體內還是體外(3D 細胞培養物)中,都可以通過氫鍵與此類變性膠原蛋白鏈特異性結合。通過共享天然膠原蛋白的結構基序和 Gly-XY 重復序列,CHP 具有與變性膠原蛋白鏈雜交的強大能力,其方式類似于 PCR 過程中 DNA 片段與其互補 DNA 鏈退火。 CHP是一種針對未折疊膠原蛋白分子的極其特異性的探針:由于缺乏結合位點,它對完整膠原蛋白分子的親和力可以忽略不計;由于其中性和親水性,它對非特異性結合也呈惰性。


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艾美捷科技強烈推薦Advanced BioMatrix熱銷產品膠原蛋白雜交肽、生物素結合物(生物素)。產品僅用于科研,不可用于臨床診斷。

產品名稱貨號詳情
膠原蛋白雜交肽、生物素結合物(生物素)ABM-5265-60UG查看


膠原蛋白雜交肽、生物素結合物(生物素)概念驗證結果

A. 用 F-CHP(濃度為15 ?M,在4°C孵育過夜)染色的豬韌帶冰凍切片的熒光顯微圖。右側面板顯示的樣本經熱水處理以有意地變性膠原??梢栽谧冃詷颖局袡z測到結合膠原的 F-CHP 的顯著熒光信號,而在完整切片中看不到信號,表明 CHP 對變性膠原鏈具有高特異性。兩個樣本在相同條件下染色和成像。比例尺:200 ?m

B. 冷凍豬韌帶切片顯示了 R-CHP 在完整(中間)和熱變性組織樣本(左側)之間結合的 drast ic 差異。與經預熱的單體 R-CHP(左側)相比,未經預熱步驟使用的三螺旋 R-CHP(右側)顯示了結合的顯著減少。比例尺:1000 ?m。藍色:DAPI 染色的細胞核。

C. 經過熱介導的抗原修復后,在福爾馬林固定(FFPE)的豬韌帶切片中,通過使用 B-CHP 進行免疫組化,可以非熒光地可視化完整的膠原含量,進一步通過 NeutrAvidin 的辣根過氧化物酶(HRP)共軛檢測。比例尺:200 ?m。

D. CHP 能夠在 SDS-PAGE 凝膠(凝膠內 Western blot)中直接檢測膠原條帶。沖洗掉 SDS 后,含有膠原 I(1 μg)和 3T3 成纖維細胞裂解物的 SDS-PAGE 凝膠被 F-CHP 染色(左側,通過熒光凝膠成像儀成像,λex = 488 nm)。同一凝膠接著被考馬斯亮藍染色并拍照(右側)。左側圖像中裂解物和分子標記帶的缺失顯示了 CHP 對膠原鏈結合的顯著特異性。


文獻參考:

[1] Targeting and mimicking collagens via triple helical peptideassemblies. Current Opinion in Chemical Biology, 2013, 17,968–975.

[2] In situ imaging of tissue remodeling with collagen hybridizingpeptides. ACS Nano, 2017, 11, 9825–9835.

[3] Targeting collagen strands by photo-triggered triple-helixhybridization. Proceedings of the National Academy ofSciences of the United States of America, 2012, 109, 14767–14772.

[4] Visualizing collagen proteolysis by peptide hybridization:From 3D cell culture to in vivo imaging. Biomaterials, 2018,183, 67–76.

[5] Direct detection of collagenous proteins by fluorescentlylabeled collagen mimetic peptides. Bioconjugate Chemistry,2013, 24, 9–16.

[6] Molecular level detection and localization of mechanicaldamage in collagen enabled by collagen hybridizingpeptides. Nature Communications, 2017, 8, 14913, doi:10.1038/ncomms14913.

[7] Molecular assessment of collagen denaturation indecellularized tissues using a collagen hybridizing peptide.Acta Biomaterialia, 2017, 53, 268–278.


美國Advanced BioMatrix是3D組織培養、細胞檢測和細胞增殖等領域實驗解決方案的佼佼者,在分離、純化、凍干、細胞培養和蛋白檢測、多肽粘附、附著因子、基質硬度和其他3D matrix 產品開發方面有著豐富的經驗。

產品競爭優勢:

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. 超過1000余篇文獻引用PureCol 膠原產品,品質非常均一;

. 在3D培養基領域可提供全面的產品線;

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. 如果客戶首次接觸3D膠原凝膠,Advanced BioMatrix是預制膠原蛋白(PureCol EZ gel)供應商。



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