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特色產品Helixyte?Green dsDNA定量檢測試劑盒可用于在ssDNA、RNA和游離核苷酸存在的情況下選擇性檢測低至25 pg/ml的dsDNA。Helixyte?Green在與dsDNA結合后表現出顯著的熒光增強。該檢測方法在三個數量級上呈線性,序列依賴性很小,使您能夠準確測量來自許多來源的DNA,包括基因組DNA、病毒DNA、迷你制備DNA或PCR擴增產物。Helixyte?Green dsDNA定量分析試劑盒的靈敏度比紫外吸光度讀數高幾個數量級。它在等摩爾量的RNA存在下對dsDNA具有特異性。該試劑盒具有強大的混合讀取格式,與96孔和384孔熒光微孔板閱讀器兼容。它也可以與臺式熒光計或手持式熒光計(如Qubit熒光計)一起使用。
貨號:AAT-17650
單位大小:200 測試
目錄編號:17650
激發(納米):
502
發射(納米):
522
H-短語:H303, H313, H340
危險符號:T
預期用途:僅限研究使用(RUO)
R-短語:R20, R21, R68
UNSPSC:41116134
激發:490 納米
發射:525 納米
截止:515 納米
推薦板:實心黑色
組分:
組分 A:Helixyte Green? 1 瓶(100 ?L,DMSO 中 200X)
組分 B:測定緩沖液 1 瓶(50 mL)
組分 C:牛胸腺DNA標準 1 瓶(200 ?L,100 ?g/mL)
協議概要:
加入 100 ?L dsDNA 標準品或測試樣本
加入 100 ?L Helixyte Green? 工作溶液
在室溫下孵化 5-10 分鐘
在 Ex/Em=490/525 納米監測熒光
重要說明:
以下是一個使用 Helixyte Green? 量化 dsDNA 的示例協議。在打開之前,請讓所有組分升至室溫。目前沒有數據涉及 Helixyte Green?dsDNA 染色劑的致突變性或毒性。由于這種試劑與核酸結合,應將其視為潛在的致突變物,并進行適當處理。DMSO 庫存溶液應特別小心處理,因為 DMSO 已知能促進有機分子進入組織。
dsDNA 標準:
將 2 ?L 的 100 ?g/mL dsDNA 庫存溶液(組分 C)加入到 198 ?L 的測定緩沖液(組分 B)中,以獲得 1 ?g/mL dsDNA 溶液,然后進行 1:2 連續稀釋以獲得連續稀釋的 dsDNA 標準(DS7 - DS1)。
工作溶液的準備:
通過將 50 ?L 的 Helixyte Green?(組分 A)加入到 10 mL 的測定緩沖液(組分 B)中來準備 Helixyte Green? 工作溶液。用箔紙覆蓋或將其置于暗處以保護工作溶液不受光線影響。注意:建議在塑料容器而不是玻璃容器中準備此溶液,因為染料可能會吸附到玻璃表面。為了獲得最佳結果,應在制備后幾小時內使用此溶液。

圖:使用Helixyte Green?(藍色)和Invitrogen?Quant-iT?PicoGreen?dsDNA試劑(紅色)比較dsDNA劑量反應。dsNDA標準品在試管中孵育,并使用varian cary eclipse熒光分光光度計進行測量。
Helixyte綠色熒光dsDNA定量試劑盒文獻參考:
Inhibitors of Streptococcus pneumoniae surface endonuclease EndA discovered by high-throughput screening using a PicoGreen fluorescence assay
Authors: Peterson EJ, Kireev D, Moon AF, Midon M, Janzen WP, Pingoud A, Pedersen LC, Singleton SF.
Journal: J Biomol Screen (2013): 247
Validation of a PicoGreen-based DNA quantification integrated in an RNA extraction method for two-dimensional and three-dimensional cell cultures
Authors: Chen Y, Sonnaert M, Roberts SJ, Luyten FP, Schrooten J.
Journal: Tissue Eng Part C Methods (2012): 444
Characterization of PicoGreen interaction with dsDNA and the origin of its fluorescence enhancement upon binding
Authors: Dragan AI, Casas-Finet JR, Bishop ES, Strouse RJ, Schenerman MA, Geddes CD.
Journal: Biophys J (2010): 3010
Comparison of SYBR Green I-, PicoGreen-, and [3H]-hypoxanthine-based assays for in vitro antimalarial screening of plants from Nigerian ethnomedicine
Authors: Abiodun OO, Gbotosho GO, Ajaiyeoba EO, Happi CT, Hofer S, Wittlin S, Sowunmi A, Brun R, Oduola AM.
Journal: Parasitol Res (2010): 933
Metal-enhanced PicoGreen fluorescence: application to fast and ultra-sensitive pg/ml DNA quantitation
Authors: Dragan AI, Bishop ES, Casas-Finet JR, Strouse RJ, Schenerman MA, Geddes CD.
Journal: J Immunol Methods (2010): 95

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