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特色產品一、產品概述
由艾美捷Bethyl Laboratories推出的兔抗CEP152抗體親和純化抗體,貨號:A302-480A是一款以兔為宿主來源、針對人CEP152(中心體蛋白152 kDa)的多克隆抗體。該抗體采用抗原親和純化工藝制備,以完整IgG形式提供,濃度高達1000 ?g/ml(1 mg/ml),未偶聯任何標記物,主要適用于免疫沉淀應用。其超高濃度設計特別適合從細胞裂解物中高效富集CEP152蛋白及其相互作用復合物,是中心粒復制及中心體生物學研究的專用工具。
二、靶點信息:CEP152(中心體蛋白152 kDa)
CEP152(Centrosomal protein of 152 kDa)是果蠅asterless(Asl)蛋白的人類同源物,在中心粒復制過程中發揮關鍵調控作用。其主要功能包括:
中心粒復制:CEP152是中心粒雙體形成和復制的必需因子,參與招募PLK4等關鍵激酶至中心粒復制起始位點
中心體結構維持:作為中心體支架蛋白,CEP152與其他中心體蛋白(如CEP192、CEP63)協同作用,確保中心體的結構完整性
遺傳關聯:CEP152基因突變與多種疾病相關,包括常染色體隱性原發性小頭畸形4型(MCPH4)、Seckel綜合征5型(SCKL5),提示其在神經發育和細胞分裂中的重要性
別稱:asterless、Cep152、MCPH4、MCPH9、SCKL5
三、免疫原與特異性
本抗體識別的表位位于人CEP152蛋白的特定區域。規格書中簡要標注的免疫原區間為“Between 900 and 950”,而詳細生產程序中明確說明:所識別表位對應于第825至875位氨基酸殘基之間(參考序列EAW77355.1,GeneID 22995)。兩者可能存在描述差異,實際操作中以825–875作為實際表位參考更為準確。
抗體采用固相載體上固定的表位特異性肽段進行親和純化,確保對CEP152的高特異性識別,避免與其他中心體蛋白或大分子支架蛋白發生交叉反應。
四、產品規格與儲存
參數 | 詳情
靶點 | CEP152
反應性 | 人
宿主 | 兔
克隆性 | 多克隆
形態 | 全IgG
亞型 | IgG
偶聯物 | 未偶聯
純度 | 抗原親和純化
抗原種屬 | 人
濃度 | 1000 ?g/ml
緩沖液 | Tris-檸檬酸-磷酸緩沖液,pH 7–8,含0.09%疊氮鈉
儲存條件 | 2–8°C
有效期 | 自收貨起1年
濃度測定:采用比爾定律測定免疫球蛋白濃度,其中1 mg/ml IgG在280 nm波長的吸光度為1.4。
五、應用與推薦條件
應用 | 推薦用量/稀釋度 | 備注
免疫沉淀(IP) | 6 ?g/mg 裂解物 | 每毫克總蛋白使用6 ?g抗體,這是本抗體的核心驗證應用
免疫印跡(IP產物檢測) | 未提供直接稀釋度 | 通過IP富集后,使用抗兔IgG輕鏈HRP二抗進行WB檢測
重要說明:本抗體未直接驗證用于細胞裂解物的常規WB檢測(即直接上樣WB)。其設計和使用場景為:先使用A302-480A進行免疫沉淀富集CEP152,隨后對IP產物進行WB檢測。如需檢測總裂解液中CEP152的表達水平,建議使用其他經驗證的WB抗體或自行驗證本抗體在WB中的適用性。
六、IP產物WB檢測操作要點
通用條件:
封閉液及抗體稀釋液:5% Milk-TBST
一抗孵育:過夜(overnight)——此處一抗指用于檢測IP產物的抗體(可以是本抗體或其他抗體)
免疫沉淀產物WB檢測的特殊要求:
二抗推薦:抗兔IgG輕鏈HRP偶聯抗體
封閉緩沖液添加:5%正常豬血清(貨號S100-020),以降低非特異性背景
七、產品優勢總結
1. 超高濃度(1000 ?g/ml):遠超常規抗體,IP用量僅6 ?g/mg裂解物,性價比極高,適合大規模IP及多次重復實驗。
2. 明確表位定位:靶向825–875aa區域,位于蛋白中部,避免與N末端或C末端其他中心體蛋白產生交叉反應。
3. 親和純化高特異性:抗原特異性親和純化確保低背景,適合內源性蛋白的免疫沉淀。
4. IP專用設計:專門針對免疫沉淀應用進行驗證和優化,提供明確的6 ?g/mg用量,無需用戶摸索。
5. IP-WB配套方案:提供優化的IP產物WB檢測條件(輕鏈HRP二抗 + 5%正常豬血清),有效降低背景,提高檢測靈敏度。
6. 穩定儲存:2–8°C保存,無需冷凍,有效期一年,避免反復凍融。
A302-480A是一款針對CEP152蛋白中部區域(825–875aa)的親和純化兔多克隆抗體,濃度為1000 ?g/ml,專門用于免疫沉淀應用。其超高濃度、明確的IP用量(6 ?g/mg裂解物)及優化的IP產物WB檢測條件(輕鏈HRP二抗 + 5%正常豬血清)使其成為中心粒復制、中心體生物學及小頭畸形機制研究的核心工具。在使用時需注意:本抗體未驗證直接WB,必須通過IP富集后檢測;嚴格遵循裂解液選擇、預澄清、洗滌及對照設置等優化步驟,可獲得高特異性、低背景的IP結果。對于研究CEP152蛋白相互作用、翻譯后修飾及復合物組裝的實驗體系,A302-480A提供了可靠、高效的解決方案。

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