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兔抗SMARCB1/SNF5抗體親和純化,高純度無雜,靶向特異性強

發布者:艾美捷科技    發布時間:2026-04-16     
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一、產品概述

由艾美捷Bethyl Laboratories推出的為針對SMARCB1/SNF5(亦稱INI1、BAF47)的兔源多克隆抗體(貨號:A301-087A),經抗原親和純化,適用于免疫組化(IHC)、免疫沉淀(IP)及Western Blot(WB)檢測。SMARCB1是人SWI/SNF染色質重塑復合物的核心亞基,在調控基因轉錄、細胞分化和腫瘤抑制中發揮關鍵作用。該基因突變或缺失與惡性橫紋肌樣瘤(MRT)、非典型畸胎樣/橫紋肌樣瘤(AT/RT)等多種惡性腫瘤密切相關。

 

二、關鍵規格參數

參數 | 詳細信息

靶標 | SMARCB1 / SNF5 / INI1 / BAF47

反應性 | 小鼠、人

宿主 | 兔

克隆性 | 多克隆

免疫原 | 人SMARCB1蛋白第100至150位氨基酸之間的區域(實際表位位于75-125區間)

亞型 | IgG

純化方式 | 抗原親和純化

濃度 | 1000 ?g/ml

存儲條件 | 2 - 8 °C

保質期 | 收貨后1年

緩沖液 | Tris-檸檬酸鹽/磷酸鹽緩沖液,pH 7-8,含0.09%疊氮化鈉

 

三、免疫原與特異性識別

本抗體識別的表位位于人SMARCB1蛋白第75至125位氨基酸殘基之間(參考編號NP_003064.2,GeneID 6598)。該區域對應SMARCB1蛋白的N末端結構域,避開了與其它SWI/SNF家族亞基高度同源的區域,確保特異性識別。

抗體通過固相載體上固定的SMARCB1/SNF5特異性表位進行親和純化,有效去除非特異性抗體。免疫球蛋白濃度采用比爾定律測定(1 mg/mL IgG在A280處吸光度為1.4)。

種屬交叉反應性:已驗證反應性包括人和小鼠,適用于兩個物種的樣本檢測。

 

四、應用方法與推薦條件

4.1 Western Blot(WB)

參數 | 條件

稀釋比例 | 1:2000 - 1:10,000

封閉/稀釋液 | 5% 脫脂牛奶-TBST

一抗孵育 | 過夜孵育

二抗(細胞裂解液WB) | 山羊抗兔IgG重鏈和輕鏈抗體(貨號A120-101P)

二抗(免疫沉淀物WB) | 抗兔IgG輕鏈HRP結合抗體,封閉液中添加5%正常豬血清(貨號S100-020)

操作提示:SMARCB1在多種細胞系中廣泛表達(分子量約44 kDa),推薦起始稀釋度為1:2000。若信號過強,可上調至1:5000-1:10000。建議使用HeLa、HEK293或小鼠NIH/3T3細胞裂解液作為陽性對照。

4.2 免疫沉淀(IP)

參數 | 條件

推薦用量 | 6 ?g 抗體 / mg 細胞裂解蛋白

該用量可在人或小鼠細胞裂解液中有效富集SMARCB1及其結合的SWI/SNF復合物。若目的為分析復合物中其他亞基(如BRG1、BRM),建議使用非變性裂解緩沖液。

4.3 免疫組化(IHC)

參數 | 條件

稀釋比例 | 1:1000 - 1:5000

抗原修復 | 推薦使用檸檬酸鹽緩沖液(pH 6.0)進行熱誘導抗原修復

樣本類型 | 福爾馬林固定、石蠟包埋(FFPE)組織切片

操作提示:SMARCB1在正常細胞核中呈均勻強陽性表達,在橫紋肌樣瘤中因基因缺失而完全丟失。本抗體可有效區分SMARCB1表達正常(核陽性)與完全缺失(核陰性)的樣本,是臨床診斷AT/RT和MRT的重要工具。建議使用扁桃體或正常腦組織作為陽性對照,橫紋肌樣瘤組織作為陰性對照。稀釋比例可從1:1000起始,根據信號強度上調至1:5000,背景極低。

 

五、生物學功能

SMARCB1/SNF5/INI1是人SWI/SNF(亦稱BAF)染色質重塑復合物的核心核心亞基,主要功能包括:

染色質重塑:作為SWI/SNF復合物的必需組分,利用ATP水解能量重塑核小體結構,調控基因的可及性

轉錄調控:參與多種發育相關基因、腫瘤抑制基因的轉錄激活或抑制

細胞周期調控:通過與p53、RB等通路相互作用,控制G1/S檢查點

腫瘤抑制:SMARCB1是經典腫瘤抑制基因,雙等位基因失活導致橫紋肌樣瘤易感性

 

六、存儲與穩定性

存儲溫度:2 - 8°C,請勿冷凍。高濃度(1000 ?g/ml)配方在冷藏條件下極為穩定,避免反復開蓋。

保質期:收貨后1年內保持完整活性。

防腐劑:含0.09%疊氮化鈉,可抑制微生物污染。若下游應用涉及HRP檢測,疊氮化鈉會抑制過氧化物酶活性,需通過透析或脫鹽柱去除。

緩沖液體系:Tris-檸檬酸鹽/磷酸鹽緩沖液(pH 7-8),兼容多數免疫檢測體系。

 

本產品適用于染色質生物學、腫瘤病理學、表觀遺傳調控及發育相關研究領域。


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