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特色產品一、產品概述
由艾美捷Bethyl Laboratories推出的hnRNP-H抗體(貨號A300-511A)是一款針對人及小鼠異質核核糖核蛋白H(hnRNP-H/HNRNPH1)的兔源多克隆抗體,由美國制造,采用抗原親和純化工藝制備。該抗體以未偶聯的完整IgG形式提供,濃度為1000 ?g/ml,適用于免疫組織化學(IHC)、免疫沉淀(IP)和免疫印跡(WB)等多種應用場景,是RNA代謝、前體mRNA加工及剪接調控研究的重要工具。
二、技術規格
參數 | 詳細信息
靶標 | hnRNP-H(HNRNPH1)
反應性 | 人、小鼠
宿主 | 兔
克隆性 | 多克隆
格式 | 完整IgG
亞型 | IgG
偶聯物 | 未偶聯
純度 | 抗原親和純化
抗原物種 | 人
濃度 | 1000 ?g/ml
保存條件 | 2-8°C
有效期 | 收貨后1年
緩沖液 | Tris-檸檬酸鹽/磷酸鹽緩沖液,pH 7-8,含0.09%疊氮化鈉
三、免疫原與純化工藝
該抗體識別的表位位于人hnRNP-H1蛋白第400位氨基酸至C末端(第448位殘基)之間(編號參考NP_005511.1,GeneID 3187)。表位覆蓋了hnRNP-H的C端區域,該區域富含甘氨酸和精氨酸,參與RNA結合及蛋白-蛋白相互作用。
純化方式:使用固相載體上固定的hnRNP-H特異性表位進行抗原親和純化
濃度測定:通過比爾定律測定,1 mg/mL IgG在280 nm波長下的吸光度為1.4
四、產品背景
hnRNP-H的分子功能
異質核核糖核蛋白H(hnRNP-H)屬于一組廣泛表達的hnRNP家族蛋白,這些蛋白能夠結合異質核RNA(hnRNA)并形成復合物,在前體mRNA加工和運輸中發揮關鍵作用。hnRNP-H特異性地結合前體mRNA上的順式作用元件,通過影響小核核糖核蛋白(snRNP)的結合,作為剪接輔助因子參與可變剪接調控。
結構與亞型
HNRNPH1基因編碼的蛋白包含三個RNA識別基序(RRM),賦予其對富含G的序列(尤其是GGG重復)的高親和力。hnRNP-H在多種組織中普遍表達,參與調控基因表達的多層次過程,包括轉錄、剪接、多聚腺苷酸化、mRNA輸出及翻譯。
五、病理生理學意義
hnRNP-H功能失調與多種疾病相關,包括癌癥(如膠質瘤、肝癌)、神經退行性疾病(如脊髓性肌萎縮癥)及肌肉萎縮癥。其參與可變剪接調控的特性使其成為精準醫學研究的熱點靶點。
六、應用方法與實驗條件
免疫印跡(WB)
推薦稀釋比:1:10,000 - 1:30,000(極高稀釋比,說明親和力優異)
封閉與稀釋液:5% 牛奶-TBST
一抗孵育:過夜孵育
細胞裂解物檢測:使用山羊抗兔IgG重輕鏈抗體(A120-101P)
免疫沉淀物檢測:使用抗兔IgG輕鏈HRP偶聯抗體,封閉緩沖液中需添加5%正常豬血清(貨號S100-020)
預期分子量:hnRNP-H蛋白分子量約49 kDa。在WB中可能觀察到約49 kDa的單一主帶,以及因可變剪接或翻譯后修飾產生的額外條帶。
免疫沉淀(IP)
推薦用量:6 ?g抗體 / mg裂解物
免疫組織化學(IHC)
推薦稀釋比:1:500 - 1:2000
抗原修復:推薦使用檸檬酸鹽緩沖液(pH 6.0)進行熱誘導抗原修復
樣本類型:福爾馬林固定、石蠟包埋(FFPE)組織切片
物種反應性
本抗體經驗證可識別人(Human)和小鼠(Mouse)來源的hnRNP-H蛋白。基于表位序列的高度保守性,預測也可與大鼠等其它哺乳動物反應,但需實驗驗證。
七、儲存與穩定性
存放于2-8°C,嚴禁冷凍。反復凍融會導致抗體聚集和活性喪失
抗體在疊氮化鈉存在下可穩定保存1年
取用時應使用無菌吸頭,避免微生物污染
如需長期保存,可分裝后添加等體積甘油存放于-20°C,但產品說明書未明確推薦此方式,優先按指示保存

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